[发明专利]一种抗病毒蛋白MxA微粒子化学发光免疫分析检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种抗病毒蛋白MxA微粒子化学发光免疫分析检测试剂盒，包括包被反应缓冲液、磁性微粒子溶液、第二抗病毒蛋白MxA单克隆抗体溶液、第一发光液、第二发光液、全血裂解液、不同浓度的抗病毒蛋白MxA抗原标准品溶液和浓缩洗涤液。本发明填补了国内抗病毒蛋白MxA检测的微粒子化学发光诊断试剂生产的空白，具有操作简单、灵敏度高、线性范围宽、结果稳定、安全性好，便于自动化等优点，在临床检验等方面具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于化学发光检测试剂盒技术领域，具体涉及一种抗病毒蛋白MxA微粒子化学发光免疫分析检测试剂盒。

背景技术

Mx蛋白的分子量约为70～80kD，其蛋白结构至少由N-末端结构域、中间结构域、C-末端结构域等3个区域组成，约300个氨基酸组成的N-末端结构域是GTP酶的活性区，约100个氨基酸组成的C-末端结构域是GTP酶的效应区，中间结构域是由约150个氨基酸组成。MxA蛋白在细胞质中与滑面型内质网相连接，与病毒的核衣壳相结合后构型发生改变，结合MxA蛋白的核衣壳以纤维状复合物的形式沉积在细胞核周围，活化的MxA蛋白使病毒失去核衣壳，病毒核酸从而被释放出来，又很快被存在于细胞质中的核酸内切酶所降解，因此达到抗病毒作用。

病毒感染时，机体内源性IFN明显增高。MxA蛋白由IFN-α/β诱导产生，能够反映体内IFN表达的情况，有助于鉴别细菌性感染和病毒性感染，其次检测MxA蛋白水平有利于对IFN疗效进行评估。目前，抗病毒蛋白MxA的临床诊断技术主要包括：酶联免疫试验(ELISA)，但因为操作繁琐，耗时长，易受人为操作和外界因素干扰，自动化程度低，而限制了抗病毒蛋白MxA检测的推广应用，使其无法广泛地应用于临床诊断与科研工作。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种抗病毒蛋白MxA微粒子化学发光免疫分析检测试剂盒。

本发明的技术方案如下：

一种抗病毒蛋白MxA微粒子化学发光免疫分析检测试剂盒，包括

包被反应缓冲液，为pH7.35～7.44的磷酸盐缓冲液，其中还含有牛血清白蛋白、酪蛋白、非离子型表面活性剂和防腐剂；

磁性微粒子溶液，其中的磁性微粒子包被有第一抗病毒蛋白MxA单克隆抗体；

第二抗病毒蛋白MxA单克隆抗体溶液，其中的第二抗病毒蛋白MxA单克隆抗体标记有吖啶酯；

第一发光液，为过氧化氢和硝酸的水溶液；

第二发光液，为氢氧化钠与非离子型表面活性剂的水溶液；

全血裂解液，为NP40(乙基苯基聚乙二醇)和DOC(脱氧胆酸钠)的水溶液；

不同浓度的抗病毒蛋白MxA抗原标准品溶液，其溶剂为上述包被反应缓冲液；

和浓缩洗涤液，为非离子型表面活性剂和生物防腐剂的磷酸盐缓冲液溶液；

其使用方法包括如下步骤：

(4)取待测全血，在其中加入上述全血裂解液，裂解并离心处理，获得上清液；

(5)在上述上清液中加入上述磁性微粒子溶液进行反应，然后用稀释后的上述浓缩洗涤液洗涤，接着加入上述第二抗病毒蛋白MxA单克隆抗体溶液进行反应；

(6)将步骤(2)所得的物料用稀释后的上述浓缩洗涤液洗涤，然后加入第一发光液和第二发光液进行反应，测定发光值，然后通过对应上述不同浓度的抗病毒蛋白MxA抗原标准品溶液的标准曲线，算出结果。

在本发明的一个优选实施方案中，所述包被反应缓冲液中含0.5％(W/V)牛血清白蛋白、0.5％(W/V)酪蛋白、0.05％(W/V)非离子型表面活性剂和适量防腐剂。