[发明专利]一种黑米稻选育方法

权利要求书

1.一种黑米稻选育方法，其特征在于，所述方法包括：

S1：以黑米稻为母本、以常规粳稻为父本，进行杂交获得F1种子；

S2：种植F1植株，以常规粳稻为父本回交一次，获得BC1F1种子；

S3：种植BC1F1植株，至少在BC1F2、BC1F3代自交过程中，选取分子标记检测含有OSB1基因的黑种皮植株、在成熟期选择叶色为绿色且粗蛋白含量低于10.0％的种子，且至少经过5代自交获得定型水稻。

2.根据权利要求1所述的黑米稻选育方法，其特征在于，所述包含分子标记检测OSB1基因的黑种皮植株，基因检测过程包括：

(21)水稻单苗栽种后8-12天，取每株水稻新鲜叶片于艾本德管中；

(22)加入提取液磨碎成浆；

(23)置于100℃水中温浴9-11min，然后冰浴1-3min，经过12000rpm离心10min，取上清液于艾本德管中，加入酒精和NH4Ac，摇匀置于-20℃环境中静置至少30min；

(24)在转速为12000rpm的条件下离心15min；用70％酒精冲洗沉淀2次，晾干，将风干的DNA溶于ddH₂O中，提取的水稻叶片基因组DNA；

(25)采用PCR检测所提取的水稻叶片基因组DNA，PCR反应条件为:95℃预变性5min，95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，进行25-35个循环，获得的PCR产物用BamHI进行酶切，酶切产物加通过8％的聚丙烯酰胺凝胶电泳，用银染法显带，获得351bp、222bp、127bp三条带的黑种皮植株。

3.根据权利要求2所述的黑米稻选育方法，其特征在于，所述选取分子标记检测含有OSB1基因的黑种皮植株、在成熟期选择叶色为绿色且粗蛋白含量低于10.0％的种子，且至少经过5代自交获得定型水稻，包括：

(31)选取分子标记检测含有OSB1基因的黑种皮植株；

(32)BC1F2、BC1F3代收割时选择茎秆分蘖力在10以上，结实率85％以上的单株；

(33)在成熟期选择叶色为绿色且粗蛋白含量低于10.0％的种子；

(34)以所选择的种子进行自交，经过五代自交获得定型水稻。

4.根据权利要求1-3任一项所述的黑米稻选育方法，其特征在于，所述方法还包括：

BC1F3、BC1F4代选择株系性状稳定、亩产为600kg以上的种子。

5.根据权利要求4所述的黑米稻选育方法，其特征在于，所述选择株系性状稳定、亩产为600kg以上的种子，包括：

单株系在田间采用行距7.5寸、间距为5寸，进行单苗种植；

成熟后收取整个小区稻谷，晒干至水份为14.5％进行亩产称重。