[发明专利]白皮杉醇在防治人巨细胞病毒感染中的新用途

说明书

本发明提供了白皮杉醇在制备防治人巨细胞病毒感染的药物中的新用途，实验表明，白皮杉醇单独处理对HCMV体外宿主细胞—人胚肺二倍体成纤维细胞WI‑38在0‑20μM没有表现出明显的毒性，白皮杉醇在10‑20μM能够抑制HCMV立即早期蛋白IE1/2和早期蛋白UL44在WI‑38中的表达，在10‑20μM能够抑制HCMV的扩增；白皮杉醇通过抑制HCMV诱导的宿主细胞衰老发挥抗HCMV活性，具体机制是抑制HCMV诱导的p16^INK4a高表达以及活性氧自由基水平的升高，进而发挥抗HCMV的作用。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体是一种白皮杉醇在防治人巨细胞病毒感染中的新用途。

背景技术

人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属疱疹病毒β亚科，在人群中感染普遍，且感染后往往终身带毒。巨细胞病毒感染患者容易导致神经系统、肝脏、呼吸系统及血液系统等损伤，严重时甚至危及生命(Rev Med Virol,2010,20:311-326)。流行病学数据表明，在大多数发达国家，大约50％的成年人口有既往感染HCMV的血清学史；在发展中国家，HCMV感染在大龄儿童和成年人群中甚至高达90％-100％。我国是HCMV感染的高发地区，儿童血清抗HCMV阳性率为83.2％-87.2％，成人则高达95％(国际检验医学杂志,2010,31:1131-1133)。因此，对巨细胞病毒感染者进行积极有效的治疗，是提高出生人口素质和提高免疫力低下老年人生活质量的重要手段。

目前对于HCMV感染的治疗，主要仍是应用丙氧鸟苷、更昔洛韦、膦甲酸等抗病毒西药，有一定的临床疗效，但并不能解决根本问题，往往停药后病毒又潜伏地回升，且具有明显的不良反应，如骨髓抑制、肾毒性和引起电解质紊乱等，因此大大限制了其临床应用(微生物学免疫学进展,2015,43:64-68)。另外，虽然近年来HCMV疫苗的研发有所进展，但仍未在临床上应用。因此，目前仍缺少安全有效的抗HCMV感染的理想药物。

研究表明，HCMV具有严格的寄生性，在体外培养中一般只在二倍体成纤维细胞中生长，人胚肺二倍体成纤维WI-38细胞是其体外宿主细胞之一，该细胞同时也常用于细胞衰老的研究，一般认为≤30PD为年轻细胞；≥55PD为复制性衰老细胞。目前，常用的实验室HCMV病毒株是Towne和AD169，这些HCMV病毒株致病能力大大减弱，但保留了良好的侵袭能力，专门用于科学研究。HCMV基因的表达呈现出一定的时序性，即表达可分为立即早期(IE)、早期和晚期。其中，IE基因对病毒其它基因以及宿主细胞的某些基因的表达和调控方面有着重要的作用，其中最主要的是IE2和IE1，尤其是IE2在HCMV诱导的细胞衰老中起重要作用，HCMV可以通过诱导IE2和IE1诱导成纤维细胞衰老相关分子p16^INK4a高表达，p16^INK4a是诱导细胞衰老最重要的分子之一(JVirol,2002,76:12135-12148)。进一步的研究表明，p16^INK4a的高表达促进了HCMV的侵染和复制(Virology,2006,349:79-86)。同时，HCMV侵染会引起宿主细胞内活性氧自由基(ReactiveOxygen Species，ROS)水平急剧升高，ROS水平的升高反过来促进HCMV的吸附、进入和复制，是加速HCMV侵染的一种机制，也是诱导细胞衰老的一个重要因素(Viruses.2015,7:2816-2833.)。

白皮杉醇是一种二苯乙烯类天然小分子化合物，主要存在于葡萄、大黄和甘蔗中，已经报道该物质具有显著的抗氧化、保护心脑血管、抗恶性肿瘤以及调节代谢等生物活性。但是本发明所涉及的白皮杉醇通过抑制HMCV诱导的p16^INK4a和活性氧自由基(ROS)升高而引起的细胞衰老进而发挥抗HCMV作用，尚未见报道。

本发明的目的是提供白皮杉醇在防治人巨细胞病毒感染中的新用途，其机制是通过抑制人巨细胞病毒诱导的细胞衰老而发挥作用，具体是抑制HCMV立即早期蛋白IE1/2的表达，进而抑制HCMV诱导的p16^INK4a高表达以及活性氧自由基水平的升高。