[发明专利]正十六烷基磷酸胆碱的制备方法及其作为疫苗免疫佐剂的应用

说明书

本发明公开了一种正十六烷基磷酸胆碱的制备方法及其作为疫苗免疫佐剂的应用。该正十六烷基磷酸胆碱的结构式如式I所示。本发明中的通过采用磷酸胆碱基团用十六烷基链进行疏水改性，制备细胞膜粘附分子正十六烷基胆碱磷酸盐，它可通过静电吸附和疏水相互作用粘附在细胞膜上，因此，可将正十六烷基胆碱磷酸盐作为疫苗免疫佐剂，其能够引发显着更高的抗原特异性体液和细胞免疫应答。本发明中制得的正十六烷基磷酸胆碱结合了磷酸胆碱CP和十六烷基链反应的优点，具有细胞黏附性，疏水性和生物安全性，可将其作为有效的疫苗递送系统，用于诱导有效的抗肿瘤免疫应答和抗癌症疾病。

技术领域

本发明属于生物医用材料领域，特别涉及一种正十六烷基磷酸胆碱的制备方法及其作为疫苗免疫佐剂的应用。

背景技术

近几年，癌症免疫治疗作为一个新一代癌症治疗策略已经显示出巨大的潜力，并引起越来越多的关注。然而，如果单独使用肿瘤相关抗原，则不能诱导有效的免疫应答。因此，有效的肿瘤治疗需要免疫佐剂的帮助以引发强烈的抗肿瘤免疫应答。

众所周知，免疫在预防严重传染疾病方面发挥了关键性的作用。此外，随着当前和新出现的严重传染性疾病，免疫接种将继续成为最重要的疾病预防工具。采用免疫接种进行疾病治疗已经取得了很好的成绩，如对一些白血病的成功免疫治疗。在免疫过程中，抗原递送是至关重要的一步。然而，抗原不能单独免疫，因为裸抗原不能在疾病预防和治疗过程中诱导有效的免疫应答。因此，在实践中不同种的抗原总是需要免疫佐剂的协助，以诱导强烈的抗肿瘤细胞免疫。同时，佐剂能够有助于诱导强烈的免疫应答同时具有生物安全性。迄今为止，在实践中广泛使用的免疫佐剂包括弗氏佐剂和铝佐剂，并且只有后者具有良好的生物安全性才得以被批准用于临床。几十年来，铝佐剂已经被用于捍卫人类免疫的许多传染性疾病。然而，用铝佐剂免疫仍不能诱导足够强的细胞免疫来对抗病毒性感染疾病和肿瘤等严重疾病。因此，迫切需要开发新型的免疫佐剂以帮助抗原引发有效的细胞免疫。

近年来，已经进行了许多工作来开发新的免疫佐剂以辅助抗原递送。从广义上讲，这种免疫佐剂也可称为“疫苗递送系统”。针对整个抗原递送过程中的不同步骤设计和制备大量的新型疫苗递送系统。广泛采用的疫苗递送系统的设计策略包括抗原包封以防止过早降解，控制抗原释放，可持续抗原释放，靶向抗原递呈细胞(APCs)，用于细胞质递送的溶酶体逃逸以促进抗原交叉递呈然后引起细胞免疫等。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种正十六烷基磷酸胆碱。

本发明的另一目的在于提供所述正十六烷基磷酸胆碱的制备方法。

本发明的再一目的在于提供所述正十六烷基磷酸胆碱作为疫苗免疫佐剂的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种正十六烷基磷酸胆碱，其结构式如式I所示：

所述的正十六烷基磷酸胆碱的制备方法，包括如下步骤：

(1)在保护性气体氛围下，将十六烷基二甲基叔胺和甲醇溶解到有机溶剂中，得到混合液Ⅰ；

(2)将步骤(1)中得到的混合液Ⅰ降温至-90℃～0℃，然后逐滴加入2-氯-2-氧代-1,3,2-二氧磷杂环戊烷进行反应，待反应结束后恢复至室温，放置，过滤，取沉淀，得到沉淀物II；

(3)将步骤(2)中得到的沉淀物II加热至25～90℃，搅拌反应，待反应结束后冷却至室温，洗涤，干燥，得到正十六烷基磷酸胆碱(C16-CP)。

步骤(1)中所述的保护性气体优选为氮气。

步骤(1)中所述的十六烷基二甲基叔胺和甲醇的摩尔比为1:10～10:1；优选为2:1。

步骤(1)中所述的有机溶剂优选为三乙胺。