[发明专利]一种抑制MKK7-JNK通路信号传递的靶向抗癌多肽及其应用

说明书

本发明公开了一种抑制肿瘤细胞中MKK7‑JNK通路信号传递的多肽及其应用。该多肽具有以下氨基酸序列：序列表中的SEQ ID NO.1。本发明的多肽可以进入细胞，并在体内外特异性地结合MKK7，通过抑制MKK7与RACK1结合，进一步抑制MKK7‑JNK通路的信号传递，最终抑制肿瘤细胞的生长。

技术领域

本发明属于药物技术领域，特别涉及一种特异性抑制MKK7-JNK通路信号传递的多肽，及其在制备治疗RACK1过表达且JNK异常活化的癌症疾病药物中的应用。

背景技术

JNK是MAPK家族的重要成员之一，JNK通过级联活化对细胞因子(如肿瘤坏死因子α、白介素1、表皮生长因子)及环境应激(渗透压、电力损伤、紫外辐射、氧化损伤)做出反应。其上游激酶包括MKK4和MKK7，它们能各自同时磷酸化JNK的183位苏氨酸和185位酪氨酸，使JNK发生双磷酸化而活化。此外，MKK4还可以活化P38，而MKK7仅特异性地活化JNK。JNK活化后可以参与细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡、炎症因子的产生、迁移等。JNK的异常活化可促进多种疾病的发生及发展。JNK在肝癌、吸烟引起的肺癌、肾细胞癌、食管鳞状细胞癌、胶质瘤、黑色素瘤等肿瘤细胞中，均呈现高水平的活化。利用JNK抑制剂抑制JNK的活性，可以增强肿瘤细胞对DNA损伤药物的敏感性，表明JNK在肿瘤细胞中发挥抗凋亡作用(Potapova O,Haghighi A,Bost F,et al.The Jun kinase/stress-activated protein kinasepathway functions to regulate DNA repair and inhibition of the pathwaysensitizes tumor cells to cisplatin[J].Biol Chem 1997,272:14041–4.)。敲除JNK1/2基因，降低JNK的表达则会明显抑制肿瘤的生长。

目前通过JNK途径可治疗炎症疾病、癌症疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病等，由于JNK信号通道在细胞中发挥的作用比较复杂，以ASK、MKK4为靶点的JNK信号通道抑制剂对抗肿瘤的治疗并不具有靶向性，这不仅导致该类药物对抗肿瘤的疗效不高，而且对其他脏器的毒性较大，因此通过JNK途径寻找靶向性的抗肿瘤药物至关重要。在肿瘤细胞中MKK7经磷酸化后能特异性的活化JNK，通过该信号促进肿瘤细胞生长的同时抑制肿瘤细胞的凋亡，由此可知MKK7-JNK途径在肿瘤细胞的生长发挥重要作用，因此，调控这一途径可能成为治疗癌症的新靶点。

RACK1在肝癌、非小细胞肺癌、结肠癌、食管鳞状细胞癌、黑色素瘤等肿瘤细胞中高表达，其中在非小细胞肺癌中的表达比正常肺组织高出近4倍；在结肠癌中，RACK1表达水平较正常结肠组织高约20倍。文献报道，在关于黑色素瘤的实验中减少RACK1的表达可导致JNK活化减弱，从而使黑色素瘤细胞对UV诱导的凋亡敏感性增加，裸鼠成瘤也被抑制(PabloLópez-Bergami,Hasem Habelhah,Anindita Bhoumik,Weizhou Zhang,Lu-Hai Wang,Ze’evRonai.Receptor for RACK1Mediates Activation of JNK by Protein Kinase C[J].Molecular Cell,2005,19(3).)。在肝癌的实验中显示RACK1在肝癌中高表达，并且存在与

MKK7的特异性结合位点，使得RACK1能直接与MKK7相互作用。通过RACK1与MKK7相互作用，增强上游激酶磷酸化MKK7，从而增强了JNK在HCC中的活化水平，发挥促进肿瘤生长的作用，并且增加肝癌对Fas、TRAIL诱导的凋亡的抵抗(Guo Y,Wang W,Wang J,etal.Receptor for activated C kinase 1 promotes hepatocellular carcinoma growthby enhancing mitogen-activated protein kinase kinase 7 activity[J].Hepatology.2013,57:140–151.)。以上研究对开发基于MKK7-JNK通路的特异性抗癌药物提供了启示。