[发明专利]一种甜菜叶石蜡包埋制片的方法在审
| 申请号: | 201811396411.1 | 申请日: | 2018-11-22 |
| 公开(公告)号: | CN109374378A | 公开(公告)日: | 2019-02-22 |
| 发明(设计)人: | 刘丽萍 | 申请(专利权)人: | 黑龙江大学 |
| 主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/36 |
| 代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 包晓静 |
| 地址: | 150000 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 制片 甜菜叶 包埋 脱水 石蜡包埋 包埋盒 染色 切片 浸蜡 粘片 透明 取材 石蜡 关键环节 内部组织 迅速冷却 制片技术 自然风干 包埋机 广口瓶 恒温箱 冰块 番红 放入 封片 熔蜡 碎冰 脱蜡 成功率 精炼 分割 优化 | ||
1.一种甜菜叶石蜡包埋制片的方法,其特征在于,所述甜菜叶石蜡包埋制片的方法包括以下步骤:
步骤一:将材料进行分割,置于广口瓶,固定处理24h;
步骤二:脱水2h,透明1.5h;
步骤三:采用番红、固绿对染;染色在纯酒精:纯二甲苯比例为1:1透明过程中加入染色剂,进行染色;
步骤四:浸蜡用75℃恒温箱进行,分别标记为蜡杯Ⅰ,蜡杯Ⅱ,蜡杯Ⅲ;
步骤五:采用半自动包埋机进行包埋,将材料放入包埋盒后摆好材料的位置,再将包埋盒放在碎冰机制成的冰块上,冷却;
步骤六:将载玻片涂上一层粘片剂,滴一滴40℃左右的温水,将切好的蜡带用解剖针挑起放到上边,使切片展开,然后放到60℃烘箱或展片机上烘干,烘1h以上或更长时间;
步骤七:湿封,先将加拿大树胶滴在组织的边缘位置,然后将盖玻片倾斜盖在胶液上,再将胶液压至组织上,自然风干。
2.如权利要求1所述的甜菜叶石蜡包埋制片的方法,其特征在于,所述步骤一中,分割材料,分割为3~5mm,固定于250毫升广口瓶,每瓶放置5~10个材料,固定24h。
3.如权利要求1所述的甜菜叶石蜡包埋制片的方法,其特征在于,所述步骤三中,染色剂量:1~2滴。
4.如权利要求1所述的甜菜叶石蜡包埋制片的方法,其特征在于,所述步骤四中,石蜡选用54~56,熔点53~57规格的石蜡进行包埋。
5.如权利要求1所述的甜菜叶石蜡包埋制片的方法,其特征在于,所述步骤六中,夏天高温季节切片之前,先将蜡块放入冰箱中冰冻处理,保持石蜡的硬度;当室内干燥时,增加室内湿度。
6.如权利要求1所述的甜菜叶石蜡包埋制片的方法,其特征在于,所述步骤六中,粘片剂按照体积比鸡蛋清:甘油=1:1。
7.如权利要求1所述的甜菜叶石蜡包埋制片的方法,其特征在于,所述步骤六中,脱蜡,夏天高温时,每一步骤3~5min。冬季低温时,延长时间或提高室内温度。
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