[发明专利]一种金色链霉菌发酵生产四环素的方法

说明书

本发明涉及一种金色链霉菌发酵生产四环素的方法，其工艺步骤为：将金色链霉菌原始菌株，用无菌水溶解稀释，然后接入孢子培养基中，摇匀，在33‑35℃温度条件下，培养17‑25小时，之后依次进行种子培养和发酵培养，即可。所述孢子培养基组成为：麸皮1.0‑1.5%，磷酸氢二钾0.003‑0.006%，淀粉1.0‑1.6%，硫酸镁0.01‑0.03%，玉米浆0.3‑0.8%，酵母粉0.03‑0.06%，碳酸钙0.01‑0.03%。本发明区别于现有技术采用斜面培养的方式采用孢子培养的方式发酵生产四环素，且采用配制培养基培养孢子，克服了斜面培养基中琼脂的影响因素，具有培养基不受原材料影响，材料易得，质量稳定的优势，用孢子液培养的菌种接入摇瓶种子，菌丝粗壮，舒展，对于各级培养液适应能力强，移入发酵罐代谢速度快，四环素分泌早，发酵周期短，发酵水平得到大幅度提高。

技术领域

本发明属于生物与医药技术领域，特别是涉及一种金色链霉菌发酵生产四环素的方法。

背景技术

四环素是一类大环内酯类抗生素，主要以金色链霉菌作为生产菌株。传统的发酵菌种是将冷冻管菌种制备成斜面孢子，然后再由孢子接种于种子培养基中，由生长良好的种子无菌接种于发酵培养基中。其中斜面培养基采用麸皮做主要的碳源及微量元素供给，琼脂作为凝固剂，以无机磷酸盐提供磷及少量氮源。按上述培养基配方制备的菌种存在以下缺陷：

(1)麸皮作为孢子发芽生长的唯一碳源提供者，其质量受小麦生产产地、加工方法影响非常不稳定，琼脂虽然作为凝固剂，但对四环素斜面孢子生长有特殊的影响，其成分复杂难易准确判定，所以斜面外观质量受其影响波动较大。

(2)因近些年，工业开发，环境污染日趋严重，麸皮及琼脂质量受生长条件及环境影响，越来越不稳定，造成制备的生产菌种质量不稳定；

(3)麸皮等原材料质量变化，造成新选育出的菌种发生变化，采用上述配方已与新菌种生产不适宜，制备的菌种从外观质量到内在孢子活力均受到影响。

发明内容

本发明目的就在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种不受原材料影响，材料易得，质量稳定，所制得的孢子菌丝粗壮，各级培养液适应能力强，发酵水平明显提高的金色链霉菌发酵生产四环素方法。

为实现上述发明目的所采取的技术方案为：

一种金色链霉菌发酵生产四环素的方法，其特征在于其工艺步骤为：将金色链霉菌原始菌株，用无菌水溶解稀释，然后接入孢子培养基中，摇匀，在33-35℃温度条件下，培养17-25小时，之后依次进行种子培养和发酵培养，即可。

所述孢子培养基组成为：麸皮1.0-1.5％，磷酸氢二钾0.003-0.006％，淀粉1.0-1.6％，硫酸镁0.01-0.03％，玉米浆0.3-0.8％，酵母粉0.03-0.06％，碳酸钙0.01-0.03％。

所述种子培养和发酵培养采用常规技术。

本发明区别于现有技术采用斜面培养的方式采用孢子培养的方式发酵生产四环素，且采用配制培养基培养孢子，克服了斜面培养基中琼脂的影响因素，具有培养基不受原材料影响，材料易得，质量稳定的优势，用孢子液培养的菌种接入摇瓶种子，菌丝粗壮，舒展，对于各级培养液适应能力强，移入发酵罐代谢速度快，四环素分泌早，发酵周期短，发酵水平得到大幅度提高。

具体实施方式

下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。

下述实施例中摇瓶种子培养基组成为：

淀粉2.0-4.0％，豆粉1.5-2.5％，酵母粉0.3-1.0％，蛋白胨0.3-1.0％，硫酸铵0.1-0.5％，溴化钠0-0.5％，碳酸钙0.1-0.5％，硫酸镁0.01-0.04％，磷酸二氢钾0-0.03％。