[发明专利]一株柠檬酸杆菌ZYD-1及其在六溴环十二烷降解中的应用

说明书

一株柠檬酸杆菌ZYD‑1及其在六溴环十二烷降解中的应用，菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16788。该菌株为革兰氏阴性菌，白色，呈表面隆起的灰白色不透明圆形菌落。扫描电镜下为杆状，直径0.5‑0.7μm×1‑2μm。本发明筛选的兼性厌氧降解菌ZYD‑1可以利用HBCD为唯一碳源，对于HBCD具有较高降解率。并且发现，在厌氧降解过程中，存在γ‑HBCD向α‑HBCD转化的现象。本发明发明可用于HBCD污染场地的修复，尤其是用于沉积物和底泥等厌氧环境。

技术领域

本发明属于微生物及其修复HBCD污染的应用技术领域。涉及一株具有 HBCD降解性能的新菌株柠檬酸杆菌的筛选方法及其对HBCD的降解方法及应 用。

背景技术

六溴环十二烷(HBCD)作为常用的溴化阻燃剂，是仅次于多溴二苯醚和双 酚A第三大溴化阻燃剂。其分子式为C₁₂H₁₈Br₆，溴含量达到了74.7％，主要有 三种异构体，即α-HBCD、β-HBCD、γ-HBCD，工业级HBCD主要γ-HBCD为 主，并且在160℃以上时异构体间可以相互转化。由于溴含量高，阻燃性好， 用量少，成本低，对材料性能影响小，是优良的添加型阻燃剂，因此，市场需 求量很大。中国目前是HBCD生产最多的国家，同时也是最大的使用国，据估 计我国每年生产HBCD约为18000吨，占全世界生产总量的百分之六十。由于 大规模的使用，六溴环十二烷已经广泛分布于环境的各个角落，水体、土壤、 空气、植物、野生动物、甚至是人体中也有发现。其污染是全方位，多介质的。

研究表明，HBCD表现出一定的细胞毒性。其生物可利用性直接影响到其 在生物体内的吸收积累以及毒性程度，是影响其环境行为的重要参数，也是进 行风险评价的重要环节。随着HBCDs更加广泛的使用，环境中HBCDs的水平 将持续增加，对环境的危害会更加严重，但是关于HBCDs各异构体在土壤中的 来源、分布以及环境命运报道还不多。现有的HBCD降解方法集中在光降解、 超声降解、电化学降解以及好氧、厌氧微生物降解。因为微生物降解不产生二 次污染，所以是一个研究热点。研究表明，微生物可有效降解HBCD，且厌氧 条件下的生物降解具有更高的效率。然而目前为止有关HBCD的微生物降解的 研究还非常少，更是缺乏对于不同HBCD异构体单独进行生物降解以及不同 HBCD异构体的降解产物及降解途径的相关研究。因此，高效的HBCD厌氧降 解菌株亟待发现，探讨其降解特性对于拓宽HBCD的降解途径具有重要的科学 意义和应用价值。

发明内容

本发明的目的是解决关于HBCD的微生物降解问题，提供一种HBCD降解 菌中的应用。

本发明技术方案：

本发明首先提供了一株HBCD降解菌株柠檬酸杆菌(Citrobactersp.ZYD-1)， 该菌株已于2018年11月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保 藏编号CGMCC No.16788，建议分类命名为Citrobacter sp.。

所述的菌株为革兰氏阴性菌，白色，呈表面隆起的灰白色不透明圆形菌落。 扫描电镜下为杆状，直径0.5-0.7μm×1-2μm。

本发明所述柠檬酸杆菌ZYD-1的筛选方法，具体步骤如下：