[发明专利]一种组织和细胞冻存液及其冻存方法

权利要求书

1.一种细胞或组织冻存液，其包含全神经培养基，二甲基亚砜以及血清；所述全神经培养基为Neurobasal培养基、谷氨酰胺的衍生物和细胞培养添加剂的组合物。

2.权利要求1所述的细胞或组织冻存液，所述谷氨酰胺的衍生物为GlutaMAX^TM，优选为100倍稀释。

3.权利要求1-2任一项所述的细胞或组织冻存液，所述细胞培养添加剂为B27。

4.权利要求1-3任一项所述的细胞或组织冻存液，各组分的比例为全神经培养基60％-80％，二甲基亚砜5％-15％，血清为15％-25％，优选为全神经培养基70％，二甲基亚砜10％，血清为20％。

5.权利要求1-4任一项所述的细胞或组织冻存液，全神经培养基各组分的比例为以体积计90-99％Neurobasal培养基、0.1-5％谷氨酰胺的衍生物和0.5-5％细胞培养添加剂，优选为97％Neurobasal培养基、1％谷氨酰胺的衍生物和2％细胞培养添加剂。

6.权利要求1-5任一项所述的细胞或组织冻存液，所述的血清为选自胎牛血清、马血清、羊血清、鸡血清或血清替代物。

7.一种细胞或组织冻存方法，其包括以下步骤：

1)将待冻存的组织进行分割，分割后的组织任一边长小于5mm的小块；或者将细胞进行分离；

2)将步骤1)获得的分割后的组织先浸泡于海藻酸钠溶液，再置于氯化钙溶液后，形成一层海藻酸钠钙交联保护层即可；

3)将步骤2)获得的保护后的组织放入权利要求1-5任一项所述细胞或组织冻存液中进行冻存。

8.根据权利要求7所述方法，其中，组织选自人体或动物体的组织，优选为脑组织、肌肉组织、肿瘤组织、卵巢，子宫内膜，胚胎，所述脑组织更优选为脑皮质或海马组织或胚胎期脑皮质组织；

细胞选自人体或动物体的细胞，优选为脑细胞、肌肉细胞、肿瘤细胞、卵细胞，子宫内膜细胞，胚胎细胞，所述脑细胞更优选为脑皮质细胞、海马细胞或胚胎期脑皮质细胞。

9.根据权利要求1-6任一项所述的细胞或组织冻存液在组织或细胞冻存中的用途；

优选地，组织选自人体或动物体的组织，更优选为脑组织、肌肉组织、肿瘤组织、卵巢，子宫内膜，胚胎，所述脑组织最优选为脑皮质或海马组织或胚胎期脑皮质组织；

优选地，细胞选自人体或动物体的细胞，更优选为脑细胞、肌肉细胞、肿瘤细胞、卵细胞，子宫内膜细胞，胚胎细胞，所述脑细胞最优选为脑皮质细胞、海马细胞或胚胎期脑皮质细胞。