[发明专利]一种具有氧压力排除效应的α-葡聚糖及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种具有氧压力排除效应的α‑葡聚糖及其制备方法与应用，所述α‑葡聚糖由α‑(1,6)糖苷键连接而成的主链，及α‑(1,4)、α‑(1,3)糖苷键连接而成的支链组成，糖苷键α‑(1,6)、α‑(1,4)、α‑(1,3)的摩尔比例为1：0.45～0.5：0.4～0.45，其相对分子质量为1.0x10⁵～5.0x10⁶Da。该α‑葡聚糖由肠膜明串珠菌CGMCC10064发酵生成。本发明α‑葡聚糖在水溶液中表现出良好的溶解氧排除效果，能够显著地降低液体环境中的溶解氧水平，从而缓解益生菌的氧压力。该葡聚糖来源于公认安全的肠膜明串珠菌肠膜亚种，有望在益生菌及相关的食品行业中得到广泛应用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种具有氧压力排除效应的α-葡聚糖及其制备方法与应用。

背景技术

葡聚糖是指以葡萄糖为单糖组成的同型多糖，葡萄糖单元之间以糖苷键连接。葡聚糖具有较高的分子量，主要由D-葡萄吡喃糖以α-(1,6)键连接，支链点有α-(1,2)、α-(1,3)、α-(1,4)连接的。根据溶解水的性质，可分为可溶性和不溶性。根据糖苷键的类型又可分为α-葡聚糖和β-葡聚糖。α-葡聚糖是由肠膜明串珠菌利用蔗糖发酵产生的多糖类物质，主链由α-D吡喃葡萄糖通过α-(1,6)糖苷键构成。随着微生物种类及培养条件的变化，得到的α-葡聚糖的结构大小及组成会有差异。

α-葡聚糖在食品医疗工业中有广泛的应用价值。例如，右旋糖苷因其良好的特性而被用作临床上的代血浆。但到目前为止，还没有发现一种具有氧压力排除效应的α-葡聚糖。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种具有氧压力排除效应的α-葡聚糖及其制备方法与应用，得到的α-葡聚糖在水溶液中表现出良好的溶解氧排除效果，能够显著地降低液体环境中的溶解氧水平，从而缓解益生菌的氧压力。

具体的，一方面，本发明提供了一种具有氧压力排除效应的α-葡聚糖，所述α-葡聚糖由α-(1,6)糖苷键连接而成的主链，及α-(1,4)、α-(1,3)糖苷键连接而成的支链组成，糖苷键α-(1,6)、α-(1,4)、α-(1,3)的摩尔比例为1：0.45～0.5：0.4～0.45，其相对分子质量为1.0x10⁵～5.0x10⁶Da。

具体优选的，所述α-葡聚糖由肠膜明串珠菌CGMCC10064发酵生成。所述α-葡聚糖来源于公认安全的肠膜明串珠菌肠膜亚种，有望在益生菌及相关的食品行业中得到广泛应用。

第二方面，本发明还提供了所述具有氧压力排除效应的α-葡聚糖的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将肠膜明串珠菌CGMCC10064接种到TYC培养基中，28～32℃下发酵培养后，得到发酵液；

(2)将步骤(1)的发酵液稀释后离心，取上清液，经透析袋透析后加入无水乙醇离心，收集沉淀物并溶于水后，真空冷冻干燥，即得。

其中，步骤(1)中，将肠膜明串珠菌CGMCC10064冻干粉活化获得肠膜明串珠菌CGMCC10064种子液进行接种。

优选的，步骤(1)中，肠膜明串珠菌CGMCC10064的接种量为1.0x10⁷～1.0x10⁸cfu/mL。

优选的，步骤(1)中，TYC培养基的配方组成为：胰蛋白胨1.2～1.8％、酵母提取物0.3～0.6％、蔗糖4～6％、Na₂HPO₄·12H₂O 0.1～0.3％、乙酸钠1～3％、氯化钠0.05～0.15％、碳酸氢钠0.1～0.3％、硫酸钠0.005～0.015％、L-胱氨酸0.01～0.03％，余量为水。

优选的，步骤(1)中，所述发酵培养为振荡培养，振荡的速度为150～200rpm，时间为36～72h。