[发明专利]一种早期快速筛查HPV16-E6和HPV18-E6的试剂盒

说明书

本发明公开了一种早期快速筛查HPV16‑E6和HPV18‑E6的试剂盒。本发明通过制备核酸裂解液，核酸清洗液和常温PCR反应液，制备得到一种不依赖仪器和专业操作人员的快速检测HPV16和HPV18的试剂盒。市场上目前的HPV检测方法主要是用qPCR的方法，对人员和仪器要求非常高，采样的时候需要用宫颈筛，必须依赖医疗人员辅助采样。本发明可以快速检测HPV，采样方便，检测方便，用户购买后，在家就可以完成自检，特别适用于家庭检测以及检测设备缺乏的乡镇医院。

技术领域

本发明属于生物检测领域，涉及一种医用检测耗材，具体涉及一种早期快速筛查HPV16-E6和HPV18-E6的试剂盒。

背景技术

HPV是一种无胞膜的小DNA病毒，目前约有170种HPV亚型被识别。HPV分为低危型和高危型，HPV16和HPV18是最主要的两种高危型。研究证实，99.7%的宫颈癌，是由于HPV的长期持续性感染所导致。

根据国务院办公厅发布的《关于推进分级诊疗制度建设的指导意见》，指出到2020年，基层首诊、双向转诊、急慢分治、上下联动的分级诊疗模式逐步形成，基本建立符合国情的分级诊疗制度。《中国妇女发展纲要（2011-2020）》指出，要在2020年前，将我国妇女“两癌”发生率控制在较低水平。因此，在未来我国宫颈癌筛查具有巨大的市场空间。而符合大规模筛查需求的HPV检测产品，需要满足成本可控，操作简便，最好是单人份在短时间内即可出结果的产品，即POCT的HPV检测产品，而且此类产品同样适合临床应用开展。

目前我国HPV的筛查主要采用荧光定量PCR法，从核酸的提取到样品的检测，耗时过长，对操作人员的技术性和仪器设备的精确性要求非常高，只能在专业的医院或者第三方检测平台开展筛查检测工作。

发明内容

本发明的目的则是克服了现有技术的不足，提供一种早期快速筛查HPV16-E6和HPV18-E6的试剂盒。采用快速核酸提取方法、常温核酸扩增系统和免疫层析技术，制备出一款方便快捷的HPV16-E6和HPV18-E6检测试剂盒，该产品不依赖任何检测仪器，用户在家就可以自行检测。

为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的: S1. 用棉棒刮拭阴道黏膜，获得检测样本，经过裂解和清洗后，获得核酸样本；

S2. 将核酸样本放入常温核酸扩增体系中，常温放置30分钟后，获得PCR扩增后的待检测液；

S3. 将免疫层析试纸插入待检测液中，静置5分钟，观察结果。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明采用HPV16-E6和HPV18-E6特殊标记引物，结合了三种快速检测技术，达到了简单、快速并且不依赖仪器和技术人员筛查高危型HPV16型和HPV18型的目的。

附图说明

图1是本发明主要组成部分。

主要附图标号说明：

1：棉棒；2：滤纸；3：试纸条；4：裂解液；5：清洗液；6：PCR反应液。

图2是本发明试剂盒检测流程。

主要附图标号说明：

1：棉棒；2：滤纸；3：试纸条；4：裂解液；5：清洗液；6：PCR反应液。

具体实施方式

下面结合说明书附图和具体实施方式对本发明做出进一步地详细阐述，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。

实施例1.

待检测样本中核酸快速提取，包括以下步骤：

S1. 收集样本