[发明专利]共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中咪鲜胺代谢物的分析方法

说明书

本发明涉及一种共同基团法结合UPLC‑MSMS检测植物源农产品中咪鲜胺代谢物的分析方法，其特征在于包含以下步骤：a、取植物源性农产品，加入提取溶剂，匀浆分散提取，离心分层，取上清液，再次重复提取后，合并上清液；b、a步骤中上清液加入氯化钠，混匀，离心，取上层；c、取b步骤中上清液与PSA、C18和石墨化碳黑混匀，离心，取上清；d、c步骤中上清液氮气吹至近干后，等体积20％乙腈溶液定容，作为待测样品；e、采用共同基团法结合UPLC‑MSMS进行检测。与现有技术相比，本发明的优点在于：采用共同基团法进行检测，降低了基质抑制效应，提高了残留分析的灵敏度。

技术领域

本发明涉及一种共同基团检测方法，具体涉及一种共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中咪鲜胺代谢物的分析方法。

背景技术

咪鲜胺(Prochloraz)，化学名称为N-丙基-N-[2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙基]-咪唑-1-甲酰胺，结构如图1所示。

咪鲜胺是一种广谱杀菌剂，能够通过干扰病菌体内麦角甾醇的合成，使得细胞膜功能受损，从而起到抑菌杀菌作用。咪鲜胺对多种作物由子囊菌和半知菌引起的病害具有明显的防效，也可以与大多数杀菌剂、杀虫剂、除草剂混用，均有较好的防治效果。对大田作物、水果蔬菜、草皮及观赏植物上的多种病害具有治疗和铲除作用。咪鲜胺自进入我国市场以来得到迅速推广，目前其单剂或复配制剂在我国的登记数量已达到二百余种，覆盖水稻、小麦、苹果、柑橘、黄瓜等多种农作物。

研究表明，咪鲜胺使用后会发生代谢降解，其代谢产物主要有三种，分别是N-丙基-N-[2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙基]脲(BTS44595)、N-醛基-N-丙基-N-[2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙基]脲(BTS44596)和2,4,6-三氯苯酚(BTS45186)，主要代谢途径如图2所示。由图2可见，咪鲜胺初级代谢产物主要有三种，即BTS44595、BTS44596和N-丙基-2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙胺，而这三种初级代谢产物最终均代谢为BTS45186。

咪鲜胺残留分析技术是监测咪鲜胺残留风险的重要技术支撑，目前对咪鲜胺的残留分析主要采用液相色谱法、液相色谱串联质谱法和气相色谱法等，这些分析方法主要有两个不足之处：一是部分方法仅仅检测了咪鲜胺母体或代谢物BTS45186，未对其有毒理学意义的其它代谢物进行检测，而粮农组织和世界卫生组织农药残留联席会(JMPR)报告中规定了咪鲜胺的残留物定义为咪鲜胺及其含2,4,6-三氯苯酚部分的代谢产物之和，因此这些检测方法显然会低估咪鲜胺带来的残留风险；二是采用复杂且危险性高的检测分析方法，即目前较为通用的高温水解强酸净化方法。因此，需要发明一种简单、快速、安全、高效的咪鲜胺检测分析方法对其主要代谢物进行检测。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供一种共同基团法结合超高效液相色谱串联质谱仪(UPLC-MSMS)测定咪鲜胺其中一条代谢途径中的两种主要代谢产物BTS44596和BTS45186的分析方法，该方法可以通过检测二者的共同基团部分(即2,4,6-三氯苯氧基)分别对其进行定性定量分析，该方法具有快速、安全、高效、灵敏的特点。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种共同基团法结合UPLC-MSMS检测植物源农产品中咪鲜胺代谢物的分析方法，其特征在于包含以下步骤：

a、取均质后的植物源农产品样品，加入提取溶剂乙腈，匀浆分散提取，离心分层，取上清液，剩余残渣按前述步骤重复提取，取上清液，合并两次离心得到的上清液得到上清液A；

其中，所述样品和乙腈的质量体积比为0.25～0.5g/mL；

b、向步骤a得到的上清液A里加入氯化钠，振荡，离心分层，取上清液后得到上清液B；

其中，所述氯化钠和步骤a中所述样品的质量比为0.3～0.5；