[发明专利]一种烟曲霉LSD-1及其培养方法和应用

说明书

本发明属于微生物菌株技术领域，具体涉及一种烟曲霉LSD‑1及其培养方法和应用。烟曲霉LSD‑1为Aspergillus fumigatus，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15985，保藏日期为2018年06月25日。培养方法：无菌水洗涤烟叶表面2～3次，收集沉淀；将沉淀用15mL生理盐水稀释后，按10％接种量接种到分离培养基中，在32℃，150r/min的摇床中培养3d得到培养液；将培养液涂于固体分离培养基平板上，在32℃的培养箱中培养3d得到烟曲霉LSD‑1菌落。这种烟曲霉LSD‑1能够将甾醇降解为二氧化碳和水，对甾醇降解率达到57.83％。

技术领域

本发明属于微生物菌株技术领域，具体涉及一种烟曲霉LSD-1及其培养方法和应用。

背景技术

烟草中植物甾醇主要存在于细胞膜中，不但能够促进烟草的生长，而且对烟草的安全、品质都有较大的影响。烟草中甾醇主要包括豆甾醇、菜油甾醇、β-谷甾醇以及胆甾醇4种化合物，霉变的烟叶中可能还有麦角甾醇。这些甾醇类物质在烟叶成熟后对烟草品质没有多少贡献，反而是烟气中致癌物稠环芳烃(PAHs)的主要前体物，卷烟烟气中61％的苯并[a]芘由它裂解产生。稠环芳烃不仅降低烟草的安全性，影响烟草的感官品质，而且对消费者的健康起到负面的影响。

发明内容

本发明提供的一种烟曲霉LSD-1及其培养方法和应用。本发明的烟曲霉能够有效的降解烟草中的甾醇。

本发明提供了一种烟曲霉LSD-1，所述烟曲霉LSD-1为Aspergillus fumigatus，所述烟曲霉LSD-1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.15985，保藏日期为2018年06月25日。

本发明提供了一种烟曲霉LSD-1的培养方法，首先，用无菌水洗涤烟叶表面2～3次，收集沉淀；然后，将沉淀用15mL生理盐水稀释后，按照10％接种量接种到分离培养基中，并在32℃，150r/min的摇床中培养3d，得到培养液；最后，将上述培养液涂于固体分离培养基平板上，并于32℃的培养箱中培养3d，得到烟曲霉LSD-1菌落。

进一步的，所述烟叶为雪茄烟烟叶。

进一步的，所述分离培养基由以下成分制得：

将1.8g Na₂HPO₄·12H₂O、1g K₂HPO₄·3H₂O、2g(NH₄)₂HPO₄、2g NaNO₃、1mg CaCl₂·2H₂O、1mg FeSO₄·7H₂O、0.1g MgSO₄、1.8g ZnSO₄·7H₂O、1.0g豆甾醇和1ml吐温80混合得到混合液，然后混合液进行超声震荡，并121℃下灭菌30min，得到分离培养基；

所述固体分离培养基平板由以下成分制得：