[发明专利]干细胞诱导培养基以及使用该诱导培养基的干细胞诱导培养方法

说明书

本发明提供了用于干细胞诱导培养的培养基，使用该培养基的干细胞诱导培养方法，由该培养方法获得的干细胞分泌培养液。本发明的干细胞分泌培养液具有修复衰老或受损的皮肤细胞例如角质形成细胞和成纤维细胞的功效。本发明还提供了该干细胞分泌培养液在制备美容护肤品中的用途，具有防老抗衰的良好效果。

技术领域

本发明涉及干细胞培养领域，具体地涉及用于干细胞诱导培养的培养基，使用该诱导培养基的干细胞诱导培养方法，还涉及由该培养方法获得的干细胞分泌培养液，以及该干细胞分泌培养液在制备护肤品中的用途。

背景技术

衰老是指随着年龄的增长，机体发生的功能性和器质性衰退的渐进过程。衰老一方面受机体的基因程序调控，另一方面由内外“磨损”和“消耗”所引起，二者同时作用于细胞和分子水平。皮肤位于体表，是最早显现机体衰老的组织，易于观察，已成为衰老的重要靶器官。由于皮肤直接与外界环境接触并长期受到不同外界因素的作用，它不仅随着自然的老化而在生物功能方面发生一系列的变化，而且，其变化还表现在物理性质方面。与青年状态的皮肤相比，老年性皮肤的共振传导速度加快、pH值升高、弹性下降、皮脂分泌明显减少、角质层含水量减少以及表皮通透屏障功能降低。而皮肤的衰老不仅仅只存在于老年人群体中，生活和工作在现代城市中，人们的皮肤面临着各种各样的恶劣环境的刺激，例如污染严重的城市空气、电子产品的长期辐射、学习和工作上的压力等等，都会使皮肤问题越来越严重，提前衰老、出现斑点皱纹。

干细胞是一种未充分分化的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。干细胞的旁分泌效应(paracrine action)是其发挥生理功能的最主要途径之一。所谓旁分泌效应(paracrine action)是指细胞分泌某种细胞因子对邻近靶细胞(可以同种细胞也可以是异种细胞，主要与内分泌长程效应相对)表现出的生物学作用。在皮肤底层的干细胞可以通过旁分泌效应对真皮层和角质层分泌多种成分复杂多样的生长因子，从而达到如下潜在的功效：1.激活成纤维细胞和角质形成细胞的活性；2.调节、舒缓免疫炎症反应；3.抑制纤维化和老化过程；4.抑制炎症感染。

但由于干细胞能够分泌多种成分复杂多样的生长因子，而不同的生长因子对不同的细胞可具有显著不同的作用效果，如何通过调整培养条件获得所需生长因子，这在现有的干细胞培养方法中并没有详细深入的研究探索。

发明内容

本发明人经过研究发现通过改变干细胞诱导培养基的配方，可以获得具有不同生长因子分泌倾向性的干细胞分泌培养液，获得了更好的例如对角质形成细胞、成纤维细胞等细胞类型的生长促进作用。

因此，在本发明的一个方面提供了干细胞诱导培养基，其包括干细胞基础培养基、20.0-80.0μg/mL维生素C、1.0-20.0μg/mL胰岛素、1.0-8.0μg/mL转铁蛋白和3.0-9.0ng/mL亚硒酸钠。

在一些实施方案中，所述干细胞诱导培养基包括干细胞基础培养基、30.0-50.0μg/mL维生素C、3.0-10.0μg/mL胰岛素、2.0-5.5μg/mL转铁蛋白和6.5-8.0ng/mL亚硒酸钠。

在一些实施方案中，所述干细胞诱导培养基包括干细胞基础培养基、50.0-65.0μg/mL维生素C、10.0-15.0μg/mL胰岛素、5.5-7.0μg/mL转铁蛋白和4.0-6.5ng/mL亚硒酸钠。

在本发明的另一方面提供了干细胞诱导培养基在干细胞培养中的应用。

在本发明的再一方面提供了干细胞诱导培养方法，其包括如下步骤：

步骤1.在诱导培养前，对干细胞进行传代培养；

步骤2.移除传代培养基，加入本发明的干细胞诱导培养基进行培养；

步骤3.收集上清，得到干细胞分泌培养液。