[发明专利]一种移植用牙髓间充质干细胞微球的制备体系

权利要求书

1.人牙髓间充质干细胞的制备，采用了一种三维摆动培养体系。

2.根据权利要求1所述的牙髓间充质干细胞微球的摇摆培养体系，其特征在于该体系能够使牙髓间充质干细胞不贴壁生长，并能形成三维球状立体结构。

3.根据权利要求2所述的牙髓间充质干细胞微球的摇摆培养体系，其特征在于该体系包含有1-10个水平放置的摇摆槽，能够将多个培养瓶或培养皿水平地放在该摇摆槽内。

4.根据权利要求3所述的牙髓间充质干细胞微球的培养体系，其特征在于该体系能够保持恒定的转速，在一定空间内摇摆，且转速范围为50~300rpm。

5.根据权利要求4所述的牙髓间充质干细胞微球的培养体系，其特征在于该体系能够与细胞培养箱兼容。

6.根据权利要求5所述的牙髓间充质干细胞微球的制备方法，接种于细胞培养瓶或细胞培养皿中，牙髓间充质干细胞的密度为4×10⁴~1×10⁶个。

7.根据权利要求6所述的牙髓间充质干细胞微球的制备体系，将常规方法培养的第1~6代牙髓间充质干细胞传代至新的培养瓶或培养皿，将这些培养瓶或培养皿放入牙髓干细胞三维培养体系中，并将此装置放入细胞培养箱内，培养条件为温度37℃，CO2浓度为5%。

8.根据权利要求7所述的牙髓间充质干细胞微球的获得方法，待细胞微球体扩增至直径为40~200um时，将含细胞球的培养体系移出，使用300-800rpm离心收集细胞球。

9.根据权利要求8所述的三维形态的干细胞球，将收集的细胞球使用0.9%的生理盐水进行洗涤3-6次，收集三维形态的干细胞球，使用0.1-30毫升体积进行重悬，待用。

10.根据权利要求9所述的三维干细胞球悬液，使用0.5-3mm针孔注射器将微球体吸出，注入到相应移植靶组织中。