[发明专利]自然杀伤性T细胞联合西妥昔单抗在制备治疗抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明提供了一种自然杀伤性T细胞联合西妥昔单抗在制备治疗抗肿瘤药物中的应用，涉及抗肿瘤药物技术领域。本发明自然杀伤性T细胞联合西妥昔单抗在制备治疗抗肿瘤药物中的应用通过将具有抗病毒免疫、肿瘤免疫，以及自身免疫疾病中发挥着重要作用的自然杀伤性T细胞与西妥昔单抗进行联合应用，通过研究发现，可以有效抑制肠癌细胞株的体外扩增，进而为寻求一种新的更为安全有效的组合化疗方案进行了有益的探索，对西妥昔单抗与其他类药物联合应用研究以制备抗肿瘤药物具有启示性的意义。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物技术领域，尤其是涉及一种自然杀伤性T细胞联合西妥昔单抗在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

结直肠癌是癌症相关死亡的的重要原因。几十年来，批准用于治疗结直肠癌的化疗药物只有5-氟尿嘧啶(5-FU)，它仍然是大多数晚期疾病患者的一线化疗方案的主要药物。然而，过去的十年中在转移性结直肠癌(mCRC)治疗方面已取得了很大进展，包括几种新型治疗剂包括伊立替(irinotecan)、奥沙利铂(oxaliplatin)、卡培他滨(capecitabine)等药物。重要的是，已经设计出使用这些药物的多种新的化疗方案，这导致响应率提高以及晚期疾病患者的进展时间和中位存活期不断增加。对于作为单药疗法的5-FU/甲酰四氢叶酸、伊立替康、奥沙利铂的响应率低(分别仅为23％，18％和12％)，无进展的存活期短(分别是中位4.0、4.3和4.0个月)，中位存活期也短，大约(分别是12、12 和14.5个月)。随着使用依立替康和奥沙利铂的基于5-FU的联合化疗方案“FOLFOX方案”的引入，响应率显著提高，据报道，响应率高达64％(FOLFOX7)，在一些报道中，进展时间从8.9到12.3个月，中位存活期现已接近大约20个月。

然而遗憾的是，这些更新的组合化疗方案具有提高的毒性。含伊立替康的方案与严重腹泻和其它胃肠道毒性有关，而那些含有奥沙利铂的方案与神经毒性有关。观察到的奥沙利铂的神经毒性有两种类型：第一种，累积的以及经常是伴有可干扰功能的感觉异常，第二种，限制患者接受FOLFOX方案的不适的冷敏感性。有鉴于此，寻找研发出一种更为安全有效的组合化疗方案，对抗肿瘤药物的研究就变得十分必要和迫切。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明目的在于提供一种自然杀伤性T细胞联合西妥昔单抗在制备治疗抗肿瘤药物中的应用，以改善上述问题中的至少一个问题。

本发明提供的自然杀伤性T细胞联合西妥昔单抗在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。

进一步的，所述自然杀伤性T细胞联合西妥昔单抗对肠癌细胞株在体外具有显著的抑制作用。

更进一步的，所述肠癌细胞株为LOVO、SW480或SW620中的一种。

更进一步的，所述肠癌细胞株在体外培养中的细胞密度为5×10³个/50μL。

更进一步的，所述自然杀伤性T细胞与肠癌细胞株的细胞数量比例为5~40：1。

更进一步的，所述西妥昔单抗在体外培养液中的浓度为5~20μg/ mL；

优选的，所述西妥昔单抗在体外培养液中的浓度为10μg/ mL。

进一步的，所述应用还进一步包括培养自然杀伤性T细胞，然后再将培养得到的自然杀伤性T细胞与西妥昔单抗联合应用的步骤。

进一步的，所述自然杀伤性T细胞的培养基质主要由以下成分组成：无血清培养基、自体血浆和细胞因子IL-7、IL-12、IL-15和IL-21；所述无血清培养基包括初期培养基和补液培养基。

更进一步的，所述初期培养基为X-VIVO 15培养基，所述补液培养基为AIM-V培养基。

更进一步的，所述IL-7细胞因子在自然杀伤性T细胞培养基质中的浓度为10~30ng/mL；