[发明专利]ATP6表达水平作为评估患者生育力的试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及ATP6表达水平作为患者生育力评估的应用及其试剂盒，本发明首次证实了ATP6表达水平可以作为评估精液参数正常者生育能力的参考指标，通过纯化精液，提取精子RNA进行测序，cDNA合成，使用SYbrGreen法进行荧光实时定量PCR检测，完成对ATP6表达水平的检测，诊断出精液参数正常，生育力不正常的患者。其优点表现在：(1)本发明为ATP6表达水平提供了新用途。(2)取样方便，易于检测。(3)本发明可为治疗生育力不正常提供理论依据，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体地说，是ATP6表达水平作为评估患者生育力的试剂盒及其应用。

背景技术

近15％的夫妻在初次怀孕尝试时会遭遇失败，过去20年的有关数据显示，这些临床病例中有大约30％单独出现在男性中，另有20％出现在夫妇双方均异常的人群中。因此，在大约50％的不孕夫妇中男性要负至少一半责任。男性不育是一个影响大部分人的重要医学问题。大概半数的男性不育的原因甚至在全面检查后通常也显示不出任何确定的具体原因。现阶段对这些因素的研究大多停留在单基因水平和基因组水平。研究表明，男性不育症不是一种独立的疾病，而是多种疾病或多因素综合作用的结果。精液常规是男科实验室常用的评估男性生育能力的方法，通过精子浓度、活力、形态等参数的评估能够评价对应精液使女方受孕的能力。然而在临床上仍然存在精液参数正常，却不能使女方受孕的情况。通过纯化精液参数正常却有两种不同生育结局的精子，提取精子RNA进行测序，找到了一批在两组精子中表达具有差异的基因。

中国专利申请：CN1790022A公开了精子结合抗体检测试剂，其特征在于：该试剂是由敏化羧化胶乳液、羊抗人丙种球蛋白血清组成的液体型双试剂，敏化羧化胶乳液含有标记人丙种球蛋白的羧化胶乳。该本发明具有以下优点：可满足国内各医院、计划生育部门研究与临床需要，为诊断男性免疫性不育，以及男性在接受输精管复育术后，能否恢复生育能力提供重要依据，具较大的经济价值，它操作简便，快速、敏感、特异。

中国专利申请：CN101563134A公开了用于治疗男性低生育力的药物组合物，所述药物组合物包含造成细胞外DNA对精细胞的影响降低的试剂。所述试剂可以为例如降解DNA的酶(如DNA酶)、阻断无细胞DNA和精细胞表面受体之间相互作用的物质、结合DNA的物质、抑制内源性精细胞DNA酶的物质、抑制由结合到精细胞表面受体上的DNA介导的信号传导途径的成员的物质、或刺激造成无细胞DNA对精细胞的抗生育效果降低的内源性物质的产生的试剂。该发明还提供了治疗男性低生育力的方法，所述方法包括施用该发明的药物组合物。该发明还提供了确定男性受试对象的生育力状况的方法、辅助生育的方法、选择辅助生育技术(ART)的方法和在用在辅助生育技术中的精细胞群中选择精细胞的方法。但是关于本发明ATP6表达水平作为评估患者生育力的试剂盒及其应用目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种检测ATP6表达水平的试剂的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种检测ATP6表达水平的试剂的应用，所述试剂用于制备检测患者生育力疾病的诊断试剂盒。

作为本发明的一个优选实施方案，所述疾病是精液参数正常但生育力不正常的疾病。

作为本发明的一个优选实施方案，所述试剂为实时定量PCR检测试剂。

作为本发明的一个优选实施方案，检测ATP6表达水平的实时定量PCR检测试剂包括序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物对。

作为本发明的一个优选实施方案，所述诊断试剂盒包含检测ACTB表达水平的试剂。

作为本发明的一个优选实施方案，所述检测ACTB表达水平的试剂为实时定量PCR检测试剂。