[发明专利]一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法

说明书

本发明属于花卉育种和栽培技术领域，具体涉及一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法。本发明主要包括月季植株的培养，月季离体叶片的选取与高温处理，月季离体叶片的叶绿素荧光动力学参数F_v/F_m值测定，离体叶片热害分级标准的应用等。本发明的特征为，在特定高温和一定时间处理下，不同耐热月季种质间离体叶片的叶绿素荧光动力学参数F_v/F_m值存在明显差异，能鉴定出月季的耐热性种质和热敏性种质参数。本发明操作简单、快速、能有效鉴定月季种质资源耐热性的方法，特别适宜于植株数量少或珍稀月季种质耐热性的鉴定，能极大地加快月季耐热育种和选择进程。

技术领域

本发明属于花卉育种和栽培技术领域，具体涉及一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法。本发明在不影响植株生长的前提下对其进行耐热性鉴定，便于热敏感株系保存，特别适宜于数量少或珍贵的月季种质资源的耐热性鉴定，是一种操作简单、快速、有效鉴定月季种质资源耐性的方法。

背景技术

月季(Rosa hybrida)是蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(Rosa)多年生常绿灌木，种类繁多、来源广泛，备受人们的喜爱。作为中国传统的十大名花之一，以其品种繁多、色彩绚丽、芳香浓郁、花期长等优势，被多个市选作为市花。月季原产北半球寒温带至亚热带，喜温暖，大多数月季品种最适温度白昼为15～26℃，夜晚为10～15℃。夏季温度持续30℃以上时，进入半休眠，能耐35℃高温[1]。随着温室效应逐渐加重，全球气温升高，尤其是长江流域夏季的温度高达38-40℃。夏季高温导致月季花芽停止分化而转化为营养生长，使不耐热品种夏季不开花，生长不良。此外，由于夏季高温高湿而导致月季病虫害加重，如黑斑病、白粉病尤其普遍，严重影响月季的生长发育^[1，2]。显然高温已经严重制约了月季的推广和应用。因此，建立科学有效的月季种质耐热性的鉴定方法，开展耐热月季的筛选，充分挖掘耐热月季种质，对丰富园林植物的种类具有重要的现实意义。

目前，鉴定月季耐热性的常用方法为田间鉴定法^[3]和人工模拟逆境形态和生理生化鉴定法^[2,4]。田间鉴定受环境条件和栽培条件影响很大，结果重复性差，而且所需时间长，植株种植、管养、数据采集和分析的工作量大。人工模拟逆境形态和生理生化鉴定方法测量相关生理指标较繁琐，而且对热敏材料损伤较大，尤其是一些数量少或珍稀材料，很容易死亡。上述这些鉴定(测定)方法费时费力，效率低，特别是对于一些可供鉴定样品较少的月季种质，具有很大的局限性。

发明内容

本发明在于克服现有技术的缺陷，提供一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，该方法的步骤简单快捷、稳定可靠，鉴定结果与田间观察鉴定结果一致、重复性好，特别适用于数量少或珍稀月季材料，能够有效提高月季耐热性筛选效率，加速育种进程。

本发明的技术方案如下所述：

一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，所述的方法在于利用月季一年生枝条的叶片，测定叶绿素荧光动力学参数F_v/F_m值，来鉴定出月季的耐热性，包括如下步骤：

1)植株培养：以月季耐热品种“月月红”为耐热对照，以月季热敏品种“月月粉”为热敏对照品种，将耐热性未知的待检月季种质材料，分别种植在直径为180cm的双色盆中，基质成分为泥炭土：粗珍珠岩，泥炭土与粗珍珠岩的体积比为8：1。将双色盆置于培养箱或生长室进行培养，所需的条件为：光照为20000lx，白天温度控制为25℃，处理14h，夜间温度为控制为20℃，处理10h，保持相对湿度为75％。培养周期为2个月。

2)取样：取刚开过花的月季一年生枝条，选择形态学即植株顶端往下数第3-5组复叶叶片为检材。置于自封袋中并洒少量水以保湿。迅速带回实验室，去除叶柄，将小叶叶片混合后每3片为一组，置于小自封袋中。在不对月季叶片造成机械损伤的前提下，挤出袋内空气。