[发明专利]一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法

权利要求书

1.一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征包括如下步骤：

1)植株培养：将月季材料定植在双色盆中，基质成分为泥炭土：粗珍珠岩，泥炭土与粗珍珠岩按体积比为8：1的比例配制，将定值的月季置于生长箱或生长室内培养2个月；

2)取样：取刚开过花的一年生月季枝条的叶片，置于自封袋中并洒少量水以保湿；迅速带到实验室，去除叶柄，将小叶叶片混合后每3片为一组，置于另外的小自封袋中，在不对叶片造成机械损伤的前提下，挤出袋内空气；

3)高温处理：先将叶片置于室温下暗适应30min，然后进行46℃水浴处理，使叶片始终在密封的小自封袋中；

4)数据测定：将叶片从自封袋中取出，如果叶片上有水珠，则用滤纸或纱布擦干；然后利用配置探头IMAG-MAX/L的调制荧光成像系统MAX-IMAGING-PAM测定离体叶片的叶绿素荧光动力学参数F_v/F_m值；每个材料设置3个重复，每个重复为3个样本，计算平均值，得到待测材料的F_v/F_m值；

5)根据以下分级标准确定待测月季种质的耐热性：

F_v/F_m≥0.55为耐热材料；

F_v/F_m在0.35～0.55为较耐热材料；

F_v/F_m≤0.35为热敏材料。

2.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征在于：步骤1)中的月季植株培养过程中，生长箱或生长室的光照强度为20000lx，白天温度控制为25℃，处理14h，夜间温度控制为20℃，处理10h，保持相对湿度为75％。

3.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征在于：步骤2)中的离体月季叶片的挑选过程中，选择植株顶端往下数第3-5组复叶叶片为样本。

4.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的测定方法，其特征在于：步骤3)中的离体月季叶片预处理过程中，水浴温度控制为46℃，处理时间控制为50min。

5.根据权利要求1所述的一种利用离体叶片鉴定月季种质耐热性的方法，其特征在于：步骤5)中的月季叶片耐热性鉴定过程中，以耐热的月季品种为耐热对照，以热敏的月季品种为热敏对照进行匹配测定。