[发明专利]蛋鸭环状RNA circ_13267及其检测试剂、方法与应用

说明书

本发明属于基因工程技术领域，提供了蛋鸭环状RNA circ_13267及其检测试剂、方法与应用；本发明的蛋鸭环状RNA circ_13267对应的cDNA序列如SEQID NO:1所示；本发明所述蛋鸭环状RNA的荧光定量PCR检测引物对及检测试剂盒，所述检测引物对如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；本发明还提供了所述蛋鸭环状RNA circ_13267过表达载体及其构建方法；还提供了所述的蛋鸭环状RNA及过表达载体作为分子标志物在用于鉴别蛋鸭卵泡发育情况、检测蛋鸭卵泡颗粒细胞中细胞增殖分化状况中的应用。对研究蛋鸭繁殖性状的遗传本质及提高蛋鸭繁殖力具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及蛋鸭环状RNA circ_13267及其检测试剂、方法与应用。

背景技术

环状RNA(circular RNA，circRNA)是一类新发现的内源性非编码RNA，其由一种共价键形成闭环结构的RNA分子，不受RNA外切酶影响，表达更稳定、不易降解。已有研究表明，circRNA大部分属于非编码RNA，主要由外显子衍生而来，且circRNAs在动物中具有组织特异性。近年来的研究发现，在多种生物细胞和组织中，有超过10％的表达基因能够产生circRNAs。在功能上，近年来的研究表明circRNA具有较高的丰富性，富含microRNA(miRNA)的结合位点，在细胞中起到miRNA海绵作用，可以通过吸附miRNA，竞争性抑制miRNA与靶基因结合的能力。

卵泡发育与蛋鸭的产蛋性能密切相关，直接影响蛋鸭的产蛋量。已有研究表明，禽类卵泡发育是极为复杂的生物学过程，目前人们已对家禽的卵泡发育模式有了一定的了解，但是作为决定产蛋量的重要因素，卵泡发育的具体调控机理仍需深入研究。颗粒细胞的生长状况直接影响到卵泡的发育情况，卵泡颗粒细胞可以分泌性腺激素及生长因子调控卵泡膜细胞和卵母细胞的生长、分化和成熟，同时也精确的调控卵泡的生长发育。因此，保障良好的卵泡发育、掌握卵泡发育的调控规律有助于进一步提高蛋鸭的繁殖力，对于提高蛋鸭生产性能具有重要意义。然而目前关于蛋鸭组织特异性环状RNA的研究尤其是蛋鸭卵泡环状RNA及其调控机制的研究尚未见报道。因此，迫切需要提高蛋鸭卵泡环状RNA研究水平和完整性，从而为蛋鸭基因组及其非编码RNA的研究提供科学的理论依据，以便更为深入了解蛋鸭卵泡发育的调控机制，为提高蛋鸭的繁殖性能提供理论支撑。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供了蛋鸭环状RNA circ_13267及其检测试剂、方法与应用。

为实现上述目的，本发明是这样实现的：

在本发明的第一方面，提供了一种蛋鸭环状RNA circ_13267，所述蛋鸭环状RNAcirc_13267对应的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明的蛋鸭环状RNA circ_13267是申请人基于前期完成的蛋鸭卵泡组织全转录组测序结果，通过对不同发育时期两组卵泡组织样品的测序结果进行大量生物信息学分析筛选获得的一个新的环状RNA分子。申请人将其命名为蛋鸭环状RNA circ_13267，所述蛋鸭环状RNA circ_13267对应的cDNA序列的长度为1479bp。

在本发明的第二方面，提供了所述的蛋鸭环状RNA circ_13267作为分子标志物在用于鉴别蛋鸭卵泡发育情况中的应用。

经过研究，申请人发现，本发明的蛋鸭环状RNA circ_13267分子在蛋鸭白卵泡中的表达量显著高于蛋鸭黄卵泡中的表达量，由此本发明的蛋鸭环状RNA circ_13267可作为分子标志物用于鉴别蛋鸭卵泡的发育情况。并且，该环状RNA具有闭合的环状结构，不容易受核酸外切酶攻击，在生物体内非常稳定，是理想的分子标志物。

在本发明的第三方面，提供了所述的蛋鸭环状RNA circ_13267作为分子标志物在用于检测蛋鸭卵泡颗粒细胞中细胞增殖分化状况中的应用。