[发明专利]一种类胡萝卜素降解酶的制备方法有效
| 申请号： | 201811023609.5 | 申请日： | 2018-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN109266624B | 公开（公告）日： | 2021-12-10 |
| 发明（设计）人： | 张惠玲;郝向峰;张金宏;杨丽丽;陆文静 | 申请（专利权）人： | 百瑞源枸杞股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00;C12N1/20;C12G3/026;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭晓迪 |
| 地址： | 750200 宁夏回族自治区*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 类胡萝卜素 降解 制备 方法 | ||
1.一种类胡萝卜素降解酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
①库特氏杆菌液的制备
②扩大培养
取斜面试管库特氏杆菌（
③发酵
液体培养基→接种库特氏杆菌种子液2%→30℃-35℃，pH=3.0-3.5，140r/min发酵8-10h→发酵液；
④类胡萝卜素降解酶制备
发酵液→4℃，10000 r/min离心100-150min→取上清液→类胡萝卜素降解酶粗酶液；
所述库特氏杆菌为（
上述各步骤中液体培养基组成为：硝酸钠 3g/L、磷酸氢二钾 1g/L、硫酸镁 0.5g/L、氯
化钾 0.5g/L、硫酸铁 0.01g/L、蔗糖 30g/L、YNB合成培养基6.7g/L、β-胡萝卜素15g/L；pH= 3.2。
2.根据权利要求1所述类胡萝卜素降解酶的制备方法，其特征在于，步骤还包括：将粗酶液经冷冻、干燥、浓缩并利用透析法纯化。
3.根据权利要求2所述类胡萝卜素降解酶的制备方法，其特征在于，步骤②扩大培养，各阶段的培养时间为11小时；步骤③发酵温度为33℃，发酵时pH=3.3，发酵时间为9h；步骤④类胡萝卜素降解酶制备，离心时间为120min。
4.根据权利要求1所述类胡萝卜素降解酶的制备方法，其特征在于，步骤②扩大培养，各阶段的培养时间为10小时；步骤③发酵温度为30℃-32℃，发酵时pH=3.0-3.2，发酵时间为10h；步骤④类胡萝卜素降解酶制备，离心时间为100min。
5.根据权利要求2所述类胡萝卜素降解酶的制备方法，其特征在于，步骤②扩大培养，各阶段的培养温度为36-37℃、培养时间为12小时；步骤③发酵温度为34℃-35℃，发酵时pH=3.4-3.5，发酵时间为10h；步骤④类胡萝卜素降解酶制备，离心时间为150min。
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