[发明专利]一种二新木脂素类化合物及分离制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种二新木脂素类化合物及分离制备方法和应用，属于生物医药技术领域，其名称为铁杉二新木脂素A，可用于制备抗肿瘤药物。本发明提取二新木脂素化合物的优点在于，首先通过硅胶柱色谱，进行粗分，经Sephadex LH‑20凝胶柱层析分离，再利用制备HPLC色谱分离得到单体，分离方法使用制备HPLC可控性和重现性好，微量成分不易流失，化合物纯度高，操作也较简单。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体为一种二新木脂素类化合物及分离制备方法和应用。

背景技术

多新木脂素(polyneolignans)是指结构中含有两个以上C₆C₃单元的新木脂素类天然产物，主要包括倍半新木脂素、二新木脂素、二倍半新木脂素、三新木脂素、四新木脂素，分别指由3～8个C₆C₃单元缩聚而成的不同类型的天然产物。它们结构复杂，通常含有较多羟基等极性基团，分离和结构鉴定难道很大，报道的此类化合物较少。

长苞铁杉(Tsugalongibracteata)属于裸子植物松科铁杉属下的一个残遗种类，主要分布于我国贵州东北部、广西东北部、广东北部、湖南南部以及福建南部等地区，为我国特有的植物。铁杉属植物中主要成分有木脂素类、三萜类和黄酮类化合物。目前为止还没有相关长苞铁杉树心中有效成分提取分离技术的报道。本专利公开了一种从长苞铁杉树心中分离提取一种二新木脂素的方法，体外抗肿瘤活性显示该二新木脂素有一定的抗肿癌作用，可应用于制备抗肿瘤药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种二新木脂素，及其分离制备方法和用于制备抗肿瘤药物的应用。

为达到上述目的，采用的技术方案为：

一种二新木脂素类化合物，其名称为铁杉二新木脂素A，化学结构式为：

所述的二新木脂素的分离制备方法，包括以下步骤：

1)取长苞铁杉树心，经干燥、粉碎后，用体积分数75％～95％乙醇常温浸泡提取1～4次，每次提取5～10天，合并提取液减压浓缩得到乙醇浸膏；

2)将步骤1)中所得乙醇浸膏分散于水后，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取1～4次，减压浓缩得到各部位浸膏；

3)将步骤2)中乙酸乙酯部位浸膏通过硅胶柱色谱分离，用石油醚-乙酸乙酯以体积比10:1、5:1、3:1、1:1或1:2进行梯度洗脱，经TLC检测，分为12个组分；

4)将步骤3)的第6个组分通过硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇以体积比30:1、15:1、8:1、1:1梯度洗脱，经TLC检测，分为8个组；

5)将步骤4)得到的第2个组分经Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离，95％甲醇洗脱，分为17个组分；

6)将步骤5)得到的第4个组分通过制备HPLC分离，用体积分数60％的甲醇-水，色谱柱用C₁₈，10×250mm，流速4mL/min洗脱，检测波长230nm，收集4～20min之间馏分，再分为4个组分；

7)将步骤6)得到的第4组分再次通过制备HPLC分离，用体积分数48％甲醇-水，色谱柱用C₁₈，10×250mm，流速5mL/min洗脱，收集11～14min之间色谱峰，检测波长230nm，得到铁杉二新木脂素A。

所述步骤1)中，所用乙醇的体积分数为85％～90％，回流提取2～4次，每次提取6～9天。

所述二新木脂素类化合物在制备抗肿瘤药物中应用。