[发明专利]磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法在审
申请号: | 201810946624.0 | 申请日: | 2018-08-20 |
公开(公告)号: | CN110846307A | 公开(公告)日: | 2020-02-28 |
发明(设计)人: | 包文静;金安娜;高伙妮;龚伟 | 申请(专利权)人: | 上海睿璟生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 201100 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 磁珠法 血液 基因组 dna 提取 试剂盒 使用方法 | ||
1.一种磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取100μL血液样品到样品管中,然后加入300μL细胞裂解液,混匀后室温孵育4-6min,在10000-12000rpm条件下室温离心1-2min,去除上清液;
(2)在得到的沉淀物中按顺序加200μL裂解液和10μL蛋白酶K,混合均匀后在温度为55-57℃、转速800-1000rpm的条件下孵育12-15min;
(3)室温放置5-8min后,在10000-12000rpm条件下室温离心1-2min,将上清液转移至新的样品管中,在样品管中加入100μL磁珠,使用涡旋混匀器涡旋混匀,室温静置孵育5-7min,经过离心后将样品管于磁力架上至溶液澄清;
(4)移除上清液,然后再加入500μL 75%乙醇溶液后继续涡旋混匀,然后放在磁力架上30-40S,重复本步骤一次后进行离心,然后使用移液器将底部残留乙醇溶液去除,室温静置2-5min至磁珠不反光;
(5)加入30μL的无核酸酶水/低盐缓冲液,把样品管从磁力架取下重悬磁珠,室温静置4-6min,再将样品管置于磁力架上2-3min,然后用移液器吸取上清液并将其转移至一个新的样品管中,定量质检后备用。
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