[发明专利]磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法在审

专利信息
申请号: 201810946624.0 申请日: 2018-08-20
公开(公告)号: CN110846307A 公开(公告)日: 2020-02-28
发明(设计)人: 包文静;金安娜;高伙妮;龚伟 申请(专利权)人: 上海睿璟生物科技有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 201100 上海*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 磁珠法 血液 基因组 dna 提取 试剂盒 使用方法
【权利要求书】:

1.一种磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)取100μL血液样品到样品管中,然后加入300μL细胞裂解液,混匀后室温孵育4-6min,在10000-12000rpm条件下室温离心1-2min,去除上清液;

(2)在得到的沉淀物中按顺序加200μL裂解液和10μL蛋白酶K,混合均匀后在温度为55-57℃、转速800-1000rpm的条件下孵育12-15min;

(3)室温放置5-8min后,在10000-12000rpm条件下室温离心1-2min,将上清液转移至新的样品管中,在样品管中加入100μL磁珠,使用涡旋混匀器涡旋混匀,室温静置孵育5-7min,经过离心后将样品管于磁力架上至溶液澄清;

(4)移除上清液,然后再加入500μL 75%乙醇溶液后继续涡旋混匀,然后放在磁力架上30-40S,重复本步骤一次后进行离心,然后使用移液器将底部残留乙醇溶液去除,室温静置2-5min至磁珠不反光;

(5)加入30μL的无核酸酶水/低盐缓冲液,把样品管从磁力架取下重悬磁珠,室温静置4-6min,再将样品管置于磁力架上2-3min,然后用移液器吸取上清液并将其转移至一个新的样品管中,定量质检后备用。

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