[发明专利]一种简易微量细胞培养和计数的装置及该装置的制作方法

说明书

本发明公开了一种简易微量细胞培养和计数的装置及其制作方法，该装置包括底板、基板；所述的基板设置在底板的上端，所述基板与底板紧密结合设置，所述底板为玻璃培养皿，所述基板由透明性高，生物相容性好的材料制成，所述基板上设有若干个上下贯通的通孔，所述通孔的孔径大小与显微镜中所需视野大小相匹配。相对于现有的细胞计数装置，本发明装置成本低、可重复多次使用；使用材料透气性好，生物相容性高，弹性强，对细胞无损伤；有利于细胞培养，可以集成细胞培养和细胞计数的功能；准确度高，适合微量细胞的计数；计数迅速，可同时在一块基板上进行多个样品的计数。

技术领域

本发明涉及技术领域，具体来说，涉及一种简易微量细胞培养和计数的装置及该装置的制作方法。

背景技术

在生物学研究中，有时需要对单位体积内的细胞数量进行测算，在现有计数中，此过程中一般采用细胞计数板对细胞数量进行测算，现有的用于细胞计数的装置通常用血球计数板、流式细胞术；血球计数板被用以对人体内红、白血球进行显微计数之用，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具；专利CN206696154U公开了一种血球计数板，包括底板和盖片，底板上表面设有计数池，底板上设有可移动的隔液片，该血球计数板避免了计数池内样液的实际体积大于或者小于计数池体积的情况，提高了样液计数的精确，但血球计数板仅适用于大量细胞的细胞计数，且准确性、重复性较差，不适合用于微量细胞的计数；

流式细胞仪(Flow cytometer)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来；专利CN 207051160 U公开了一种分选型流式细胞仪，包括液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统，该细胞仪提高前向散射光的检测灵敏度，且可以检测直径小于0.5μm小颗粒样本，并对20nm差异的样本进行区分和分选，因此扩大了流式细胞分选仪的应用领域。流式细胞仪可以精确到微量细胞的计数，但仪器成本较高，操作复杂，需要的样品体积较大。且现有的细胞计数装置通常只具备计数功能，功能比较单一。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处，本发明提供一种简易微量细胞培养和计数的装置及该装置的制作方法，该装置在降低设备成本的前提下，提高细胞计数的准确性，提高样品分析的效率，降低样品的使用量。

为实现上述目的，所采取的技术方案：

一种简易微量细胞培养和计数的装置，包括底板、基板；所述的基板设置在底板的上端，所述基板与底板紧密结合设置，所述底板为玻璃培养皿，所述基板由透明性高，生物相容性好的材料制成，所述基板上设有若干个上下贯通的通孔，所述通孔的孔径大小与显微镜中所需视野大小相匹配。

本发明主要针对当细胞量很少，样品珍贵的情况下，能够快速、准确地进行细胞计数的简易装置。其主要材料为聚二甲基硅氧烷(PDMS)制成的基板和普通载玻片键合而成，PDMS可由PMMA等生物相容性材料替代，本发明有利于细胞培养，可以集成细胞培养和细胞计数的功能；准确度高，适合微量细胞的计数；且计数迅速，可同时在一个基板上进行多个样品的计数。当需要进行贴壁细胞再培养时，仅需要在表面滴加0.1％多聚赖氨酸，室温放置2h后即可使用。

优选地，所述基板由PDMS或PMMA材料制成。

优选地，所述通孔的孔径大小为4mm。

优选地，所述通孔的孔径大小为5mm或2mm或0.5mm。

优选地，所述底板为载玻片。

优选地，所述基板的厚度为1～5mm。

优选地，所述基板与底板通过等离子体处理进行键合。

本发明还提供了一种所简易微量细胞培养和计数的装置的制作方法，包括以下步骤：