[发明专利]抗Her2/PD-1双特异性抗体及其制备方法

说明书

本发明公开了抗Her2/PD‑1双特异性抗体及其制备方法，属于生物技术领域。本发明提供的抗Her2/PD‑1双特异性抗体既能与Her2结合，还能与PD‑1相结合，其通过阻断Her2和/或PD‑1信号传导途径，有效地增强免疫反应，从而可能具有良好的增强抗肿瘤免疫反应的效果。

技术领域

本发明涉及抗Her2/PD-1双特异性抗体及其制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

双特异性抗体(bispecific antibody，BiAb)是含有两种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁，产生导向性的效应功能。BiAb在生物医学中，特别是在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。通过BiAb介导细胞毒作用杀死肿瘤细胞是当前免疫治疗应用研究的热点，其主要特点是BiAb能同时结合肿瘤相关抗原和免疫效应细胞上的靶分子，直接触发免疫效应细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤。

大量研究表明，肿瘤在形成过程中，可通过多重机制，逃避免疫系统的监视，我们将这一过程称之为肿瘤组织的免疫逃逸或免疫编辑。PD-1是T细胞表面的蛋白质，亦为被称作「免疫检查点」抑制剂的蛋白质之一。PD-1的正常功能是关闭作为阻止健康免疫系统攻击体内其他细胞的部分过程的T细胞介导免疫应答。PD-1附着到正常细胞或癌细胞表面上的某些蛋白质(被称为PD-1配体1(PD-L1)或PD-1配体2(PD-L2))时，T细胞会关闭其杀死细胞的能力。若干癌细胞产生大量的PD-L1和PD-L2以帮助该等癌细胞逃避T细胞攻击。抗PD-1抗体与PD-1结合并阻断其与PD-L1和PD-L2结合，从而令T细胞杀死癌细胞。

T细胞在肿瘤免疫的过程中处于核心地位，如果能调动体内的杀伤武器，将是非常有效且安全的治疗策略。总而言之，既要在体内激活原有自身的免疫系统反应，还要让已经调动的反应持续增强才是免疫治疗肿瘤的最好策略。

HER2是一种185kDa的细胞表面受体酪氨酸激酶(cell surfacereceptortyrosine kinase)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)家族的成员，所述家族包括四种不同的受体：EGFR/ErbB-l、HER2/ErbB-2、HER3/ErbB-3、和HER4/ErbB-4。所述EGFR家族的四种成员形成同二聚体和异二聚体，其中HER2是优选的且是其它ErbB受体的最强的二聚配偶体(Graus-Porta等人，Embo J 1997；16:1647-1655；Tao等人，J Cell Sci 2008；121:3207-3217)。HER2可以通过过表达或通过与其它可以由配体结合而激活的ErbB的异二聚化而激活(Riese和Stern,Bioessays l998；20:41-48)。对于HER2，还没有鉴定出配体。HER2活化导致受体磷酸化，其通过多种信号途径，如MAPK、磷酸肌醇3-激酶/AKT、JAK/STAT、和PKC，而触发下游的信号级联放大，其最终导致多种细胞功能的调节，如生长、存活、和分化(Huang等人，Expert Opin Biol Ther 2009；9:97-110)。