[发明专利]一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒，包括虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡和/或虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡和层析稀释液，其中，虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡包含虾血细胞虹彩病毒抗原胶体金层析检测试剂，虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡包含虾血细胞虹彩病毒抗体胶体金层析检测试剂，所述层析稀释液由终浓度1％casein，0.4％Tween‑20和10mMPBS缓冲系统组成；所述试剂盒具有特异性、敏感性等特点。

技术领域

本发明涉及试剂盒领域，尤其是一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒。

背景技术

自1954年Xeros在沼泽大蚊(Tiphoneula paludosa)中发现首例虹彩病毒以来，人们已经陆续从两栖类、甲壳类、鱼类和爬行类中发现虹彩病毒。根据国际病毒分类委员会第九次报告，虹彩病毒科(Iridoviridae)下设五个属：即虹彩病毒属(Iridovirus)，绿虹彩病毒属(Chloriridovirus)，蛙病毒属(Ranavirus)，淋巴囊肿病毒属(Lymphocystivirus)和细胞肿大病毒属(Megalocytivirus)，其中后面三个属的虹彩病毒可以感染鱼类。

虹彩病毒病是一种广泛存在于水生动物且危害较大的病毒性疾病。目前，虹彩病毒成为一些鱼类、两栖类动物的新型病原体，特别是水产养殖业中的经济类品种再加上其特殊的生物学特性，因此越发引起人们的关注和重视。

对虾感染虹彩病毒，最早于1993年Lightner和Redman在靠近厄瓜多尔对虾养殖场发现了被虹彩病毒感染的原糙对虾(Protrachypene precipua Burkenroad)。这是首次报道十足目动物能够感染虹彩病毒。对感染虹彩病毒的原糙对虾组织病理学观察发现，表皮上皮细胞(鳃、胃内层甚至遍布全身)呈现典型的虹彩病毒的感染；造血组织，触角腺上皮组织，以及心脏、肌肉、皮下组织、鳃、肝胰腺中的结缔组织细胞和吞噬细胞也被虹彩病毒感染。

2017年，中科院黄海研究所科研人员在浙江严重死亡的南美白对虾上发现一种新病毒，相关研究报道称新分离的病毒属于虹彩病毒科，但不属于虹彩病毒科下已建立的五个属，感染该病毒的虾造血组织、鳃丝、肝胰腺、附肢和肌肉的血细胞中出现嗜碱性包涵体和核固缩现象，因此命名为虾血细胞虹彩病毒(SHIV)。

对于虾血细胞虹彩病毒，我们的了解不是很多，也还没有正式的文献报道,建立一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒，能够方便在疫病发生早期快速、准确的诊断疫病，为疫病的防控提供有效的参考。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒，包括虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡和/或虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡和层析稀释液，其中，虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡包含虾血细胞虹彩病毒抗原胶体金层析检测试剂，虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡包含虾血细胞虹彩病毒抗体胶体金层析检测试剂，所述层析稀释液由终浓度1％casein，0.4％Tween-20和10mMPBS缓冲系统组成，其中，

所述虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡是由下述方法得到的：

病毒亲和纯化抗体的标记：选择胶体金用0.2M K2CO3调节其pH值，加入虾血细胞虹彩病毒亲和纯化抗体，室温标记和封闭，离心后用复溶液悬浮；

鸡IgY的标记：选择胶体金用0.2M K2CO3调节其pH值，用鸡IgY室温标记，标记后室温封闭，离心后用复溶液悬浮；

免疫金的制备：将病毒亲和纯化抗体免疫金和鸡IgY免疫金混合铺金，过夜烘干；

包被：

C线：在NC膜上包被抗鸡IgY多抗，加入保护剂做保护；