[发明专利]一种快速检测β-淀粉样蛋白的量子点免疫层析试纸条与应用

说明书

本发明属于免疫检测技术领域，具体涉及一种快速检测β‑淀粉样蛋白的量子点免疫层析试纸条与应用。所述的快速检测β‑淀粉样蛋白的量子点免疫层析试纸条，包含设有检测区和质控区的硝酸纤维素膜、包被量子点微球偶联Aβ40和Aβ42多克隆抗体的玻璃纤维膜、底板、样品垫和吸水垫。本发明提供的快速检测β‑淀粉样蛋白的量子点免疫层析试纸条通过量子点免疫层析技术，可实现一次反应同时检测Aβ40、Aβ42抗原指标，避免了不同蛋白互相产生交叉的问题，检测时间短，灵敏度高于酶联免疫方法10倍以上，特异性强，反应速度快，准确性高，定量准确。

技术领域

本发明属于免疫检测技术领域，具体涉及一种快速检测β-淀粉样蛋白的量子点免疫层析试纸条与应用。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)，由巴伐利亚的神经病理学家阿尔茨海默于1907年首先发现，并以其名字命名，是一种中枢神经系统变性病，起病隐袭，病程呈慢性进行性，主要表现为渐进性记忆障碍、认知功能障碍、人格改变及语言障碍等神经精神症状，严重影响社交、职业与生活功能。阿尔茨海默病是老年痴呆最常见的一种类型，约占所有痴呆的50～60％，据统计在西方国家，大于或等于85岁年龄组的患病率在24～33％之间，虽然发展中国家缺少权威性和代表性数字统计，但是估计世界上60％的痴呆患者存在于发展中国家。AD的病因及发病机制尚未阐明，特征性病理改变为β-淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结，以及神经元丢失伴胶质细胞增生等。因此β-淀粉样蛋白可以作为阿尔茨海默病为代表的以血管增生为特点的疾病诊断指标。

1930年，Divry用刚果红对AD病人脑中的损害区域进行能够染色，成功地使沉积在细胞外的老年斑着色，进而发现老年斑的主要成分是一种嗜刚果红的淀粉样蛋白，1984年Glenner等分别成功地完成了对这种蛋白的分离和测序工作，发现此蛋白是由39～43个氨基酸残基组成，因其具有一个β片层的二级结构，遂命名β-淀粉样蛋白，简称Aβ。脑内Aβ来源于其前体物质β淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)。APP是一种跨膜蛋白质，在体内各种组织广泛存在，而在脑组织的表达最高，在生理条件下，多数APP由A2分泌酶裂解成可溶性的App肽，App肽在进一步由C2分泌酶裂解产生P3极少部分APP在胞质溶酶体经β2分泌酶和C2分泌酶作用裂解为Aβ，从App代谢为β淀粉样蛋白过程分为两步：首先β2分泌酶在Aβ的N末端裂解APP，产生可溶的分泌性的APP衍生物APPS2β和贯穿膜成分的C末端片断，C末端片断进一步由C2分泌酶裂解为Aβ，Aβ有40个氨基酸和42个氨基酸2种形式，其中Aβ42容易引起聚集，具有较强的细胞毒性，在某些病理条件下，APP主要经β2分泌酶和C2分泌酶顺序剪切产生过多的Aβ导致AD病，C2分泌酶在Aβ产生中起非常重要的作用，决定了产生的Aβ42在其中所占的比例。

β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein，Aβ)分子量约4KDa，由β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein，APP)水解而来，循环于血液、脑脊液和脑间质液中，大多与伴侣蛋白分子结合，少数以游离状态存在。人体内Aβ最常见的亚型是Aβ40和Aβ42。在人脑脊液和血中，Aβ40分别比Aβ42的含量水平高10倍和1.5倍，Aβ42具有更强的毒性，且更容易聚集，从而形成Aβ沉淀的核心，引发神经毒性作用。Aβ的沉积不仅与神经元的退行性病变有关，而且可以激活一系列病理事件，包括星型胶质细胞和小胶质细胞的激活、血脑屏障的破环和微循环的变化等，是AD病人脑内老年斑周边神经元变性和死亡的主要原因。研究人员认为，β-淀粉样蛋白在脑神经细胞内部的早期蓄积表明，在脑神经细胞外还未出现β-淀粉样蛋白蓄积时，阿尔茨海默氏症就已经出现。这一发现或有助于提早诊断、治疗阿尔茨海默氏症，从而尽可能延缓病情恶化。