[发明专利]一种犬精液冷藏保存稀释液

说明书

一种犬精液冷藏保存稀释液，有以下配方组成：A液：黑枸杞提取物5‑10份、L‑肉毒碱5‑10份、L‑精氨酸2‑5份、褪黑素3‑7份；B液：维生素E3‑5份、葡萄糖5‑10份、柠檬酸10‑15份、果糖20‑40份g、大豆卵磷脂20‑40份、青霉素30‑40万IU/100ml、链霉素20‑50万IU/100ml、海藻糖10‑20份、蛋白胨10‑15份、透明质酸5‑10份，并采用特殊的提取工艺使得采用本发明配方的稀释液可以明显提升精子冷藏后的活率，冷藏后顶体的完整率。

技术领域

本发明属动物繁殖技术领域，具体涉及一种犬精液冷藏保存稀释液。

背景技术

生物技术飞速发展的今天，一些优秀种公畜的精液通过相关技术的处理制成冷藏精液，并通过人工授精技术大力推广使用。其中犬冷藏精液与人工授精技术的结合在现代养犬业中有非常广阔的市场前景，首先，它可以大大降低生殖系统疾病的传染；其次，它可以使优良种公犬得到充分利用，既有利于品种改良，又可节约公犬的饲养成本；再者，由于冷藏精液可以保存，远距离运输，因而，人工授精可以克服由于时代、地理间隔及公母犬体格差异造成的配种困难。尽管犬的精液冷藏保存研究已经开展了很多年，但是精子存活时间较短，精液保存效果差，人工授精后受胎率和产仔数均显著低于新鲜精液。稀释液是精液冷藏时必不可少的组成成分，在冷藏过程中对精子起到稀释、缓冲、营养和保护的作用，并能有效降低低温对精子的影响，已经有研究证明，通过改变精液稀释液的组成成分可以降低冷藏过程对精子的损伤。

黑枸杞含有大量的原花青素，是迄今为止，发现原花青素(OPC)含量最高的天然野生植物，OPC是最有效的天然水溶性自由基清除剂，具有很强的抗衰老作用，是一种新型高效抗氧化剂。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时；由于犬精子质膜上多不饱和脂肪酸含量丰富,当遇到活性氧族(ROS)攻击时,易发生脂质过氧化反应,造成精子氧化应激,失去受精能力。正常情况下,精浆中含有抗氧化物质,足以维持ROS产生和清除之间的平衡,但在精液稀释保存的过程中,精浆中抗氧化物质浓度降低,平衡被打破,ROS无法及时有效地被清除,使精子产生氧化损伤。因此，在精液稀释保存过程中需要添加合适的抗氧化剂，增强精子的抗氧化能力，尽量降低ROS对犬类精子的损伤。另一方面，抗氧化剂L-肉毒碱与抗氧化剂L-精氨酸可促进激活的脂肪酸从细胞质到线粒体基质的转运,减少ROS产生和脂质过氧化反应的发生；褪黑素(Melatonin,MLT)是一种由松果腺合成和分泌的重要胺类激素,具有抗氧化能力,可保护细胞的细胞膜脂质、核酸、蛋白质等成分。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述现有技术的缺陷问题，提供一种犬精液冷藏保存稀释液。

本发明的技术方案为：所述冷藏保存稀释液由以下原料配比按照重量份数混合而成：A液：黑枸杞提取物5-10份、L-肉毒碱5-10份、L-精氨酸2-5份、褪黑素3-7份；B液：维生素E3-5份、葡萄糖5-10份、柠檬酸10-15份、果糖20-40份g、大豆卵磷脂20-40份、青霉素30-40万IU/100ml、链霉素20-50万IU/100ml、海藻糖10-20份、蛋白胨10-15份、透明质酸5-10份。

一种犬精液冷藏保存稀释液：所述冷藏保存稀释液由以下原料配比按照重量份数混合而成：A液：黑枸杞提取物8份、L-肉毒碱7份、L-精氨酸3份、褪黑素4份；B液：维生素E4份、葡萄糖7份、柠檬酸12份、果糖30份g、大豆卵磷脂30份、青霉素35万IU/100ml、链霉素35万IU/100ml、海藻糖15份、蛋白胨12份、透明质酸7份。所述黑枸杞提取物提取方式为：

(1)原料处理：按照重量份数取黑枸杞再去杂，洗净，置于温度为65℃的恒温干燥箱中干燥24h，粉碎后过0.2mm筛；

(2)超声辅助处理:向超声仪中加入步骤(1)制得的粗粉，再加入6倍重量当量的浓度为65％乙醇，控制超声功率为350W、超声时间为100min；