[发明专利]八仙花提取物在制备抗HIV药物中的应用及其制备方法

说明书

本发明公开了一种八仙花提取物在制备抗HIV药物中的应用及其制备方法，本发明以八仙花干燥叶为原料，以体积分数为60％～95％的乙醇溶液回流提取，过滤，减压浓缩，得浸膏后，加适量的蒸馏水，超声溶解，过滤，得浸膏水溶液；浸膏水溶液依次用等体积乙酸乙酯、正丁醇萃取2～4次，减压浓缩得到正丁醇层浸膏，将正丁醇层浸膏采用正相硅胶柱色谱进行分离纯化，用氯仿‑甲醇进行梯度洗脱，根据TLC跟踪检测合并相同馏分，经抗HIV活性检测，获得对应体积比的氯仿‑甲醇馏分，为抗HIV有效成分，该有效成分对HIV‑1 LTR序列的下调控率为93.5％，拓展了抗HIV病毒原料渠道，扩大了八仙花的用途，可显著提高八仙花的附加值。

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种八仙花提取物在制备抗HIV药物中的应用及其制备方法。

背景技术

艾滋病(Acquired immuno deficiency syndrome，AIDS)，是一种因感染人类免疫缺陷病毒(HIV)，使CD4+T淋巴细胞及其他免疫细胞被损害，导致集体免疫功能完全丧失的传染性疾病。自1981年世界上发现艾滋病人以来，艾滋病已成为当今危害人类生命健康的三大杀手之一。目前在临床上用于防治艾滋病的药物主要是化学合成药，对于艾滋病的治疗会产生强烈的毒副作用和耐药性。迄今发现多种天然化合物具有抗HIV活性，它们具有专一性、毒副反应少、方便有效等优点。因此从药用植物中寻找抗HIV的活性成分成为当前开发抗艾滋病新药的方向与重点之一。

八仙花(Hydrangea macrophylla Ser.)为虎耳草科绣球属多年生植物，在日本，经发酵加工的八仙花亚种称为甘茶，为常用的甜味剂，作为药品、保健品和食品添加剂的原料。目前，国外科学家对八仙花属植物的活性成分进行了较多的研究及开发，但国内对中国品种的八仙花的研究与开发较少。加强国内品种的八仙花开发利用是急需解决的。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种八仙花提取物在制备抗HIV药物中的应用及其制备方法，它能拓展国内品种的八仙花的使用范围，适用于开发成抗HIV药物。

本发明是这样实现的：一种八仙花提取物在制备抗HIV药物中的应用。

所述的八仙花提取物是从八仙花叶的醇提物中分离获得极性部位。

八仙花提取物的制备方法，包括如下工艺步骤：

(1)八仙花浸膏的提取：将八仙花干燥叶粉碎，用体积百分比为60％～95％的乙醇溶液回流提取3次，分别为4h、3h、2h，合并提取液，过滤，减压浓缩得浸膏；浸膏加蒸馏水，并进行超声溶解，过滤，得浸膏水溶液；

(2)浸膏水溶液不同极性部位的萃取：将浸膏水溶液先用乙酸乙酯萃取2～4次，萃取之后的浸膏水溶液再用正丁醇萃取2～4次，将获得的正丁醇萃取液合并之后进行减压浓缩得到正丁醇层浸膏；

(3)正丁醇层浸膏不同极性部位分离：采用正向硅胶色谱法梯度洗脱，得到不同极性部位，经过抗HIV活性检测，取活性最强的部位作为最终提取物。

浸膏水溶液与每次用于萃取的乙酸乙酯的体积比为1:7-10，每次用于萃取的正丁醇的体积与每次用于萃取的乙酸乙酯的体积相同。

步骤(3)所述的正丁醇层浸膏不同极性部位分离，具体是：将正丁醇层浸膏采用200～300目正相硅胶柱色谱进行分离纯化，用氯仿-甲醇按照体积比1∶0～0∶1进行梯度洗脱，等馏分收集，根据TLC跟踪检测合并相同馏分，减压除去氯仿和甲醇，根据抗HIV活性检测结果，氯仿-甲醇7∶1体积比馏分，为抗HIV最终收集的有效成分。

为了进一步验证本发明的技术效果，进行了如下实验：

1八仙花抗HIV有效成分的制备