[发明专利]一种凉粉草酸性多糖的脱色方法

说明书

本发明公开了一种超声‑双氧水结合大孔树脂的凉粉草酸性多糖的脱色方法，包括原料预处理、乙醇除杂、弱碱水提、粗多糖酶解、凉粉草多糖浓缩液超声‑双氧水脱色、AKTA‑大孔树脂层析系统脱色、透析、离心、多糖的获得这9个步骤，操作简便，本发明操作条件温和，脱色期较短，多糖得率较高，综合成本较低的凉粉草酸性多糖的脱色。

技术领域

本发明专利涉及从凉粉草中提取的凉粉草酸性多糖的一种脱色方法，属于天然产物生物活性物质的提取分离纯化领域，包括提取、滤液预处理、脱色等相关技术。

背景技术

凉粉草(Mesona chinesis)又名仙草、仙人草、仙人冻、薪草，系唇形科仙草属一年生草本植物，在我国具有多年食用和药用历史。凉粉草主要分布在中国以及印度、越南、缅甸等东南亚国家，我国以福建省和广东省的栽培面积最大，广泛分布于江西、广东、福建、广西、云南等地。作为药食两用植物资源，凉粉草具有很高营养价值和潜在医疗保健作用，主治中暑、热毒、糖尿病、烧烫伤、黄疸、痢疾、关节肌肉疼痛、肾脏病等。

凉粉草资源丰富、价格低廉且可食用，多糖是凉粉草中主要的生物活性物质。具有抗氧化、免疫调节，降血糖等多种生理功能。目前，凉粉草多糖的提取方法有纤维素酶提取法、传统水煮法、热水碱提法，也有在碱提基础上，采用高温高压、微波辅助、超声辅助提取。但提取的凉粉草多糖色泽呈黑褐色，其色泽不仅影响多糖的质量与纯度，影响到多糖的分离纯化、结构鉴定及其构效关系研究，最终影响到多糖产品的质量。传统的生产工艺采取吸附法进行脱色，操作工时长，在10小时以上。吸附法多选用白陶土或活性炭作为吸附剂，操作繁琐，且吸附剂均可吸附目标产品，造成多糖的得率低、纯度也不高，活性多糖成分损失较大，难以满足市场需求，超声-过氧化氢联合大孔树脂法用以去除凉粉草多糖色素尚未见有文献报道。

发明内容

一种凉粉草酸性多糖的脱色方法：具体包括以下步骤：

(1)原料预处理：净选凉粉草，清除杂草、腐叶，将原料凉粉草粉碎至10～40目待用；

(2)乙醇除杂：第一次加入6～8倍凉粉草重量的75％的乙醇先浸泡12～24h，第二次用4～5倍量70％乙醇浸泡6～12h，将凉粉草放入通风橱待乙醇挥发完全后，再移至40℃烘箱烘干，得到脱脂凉粉草粉末；

(3)弱碱水提：将上述挥干乙醇的凉粉草用浓度为0.5～2.0％的碳酸钠水溶液、控制料液比为1:20～1:10，80～95℃下提取，提取时间2～4h，浸提后稍微冷却，趁热用纱布过滤，滤液离心，收集滤液，滤渣反复提取两次，合并滤液，将提取液用旋转蒸发仪旋蒸真空浓缩，减压低温至原滤液的1/3体积后，于4℃保存备用；

(4)粗多糖酶解：将步骤(3)中得到的浓缩滤液，加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶加入量为粗多糖水溶液的3-5w/w％，于35～45℃反应30～60min，酶解后将酶解液置于沸水灭酶5min，将灭酶后的酶解液进行离心控制离心转速为4800rpm，时间5min，取上清液，备用；

(5)凉粉草多糖上清液超声-双氧水脱色：将步骤(4)中所得的凉粉草多糖上清液在中加入浓度为30％的双氧水，用氨水调节pH 8～10，混匀，所述的双氧水占凉粉草多糖上清液体积比的2～5％，其中超声功率：100～150W，超声时间0.5～1h，温度35～45℃，同时搅拌，双氧水脱色机理为：

H₂O₂+·OH→H₂O+·HO₂

·HO₂+·OH→H₂O+O₂

·OH+·OH→H₂O₂；