[发明专利]一种检测猫白血病病毒的引物对、引物组、试剂盒及应用

说明书

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，涉及一种检测猫白血病病毒的引物对、引物组、试剂盒及应用。所述引物对以外源性FeLV保守的3’LTR核苷酸序列为扩增区域设计而成，具有灵敏度高、特异性好、方便检测等优点。所述引物组包括上述引物对及检测猫内源性白血病病毒的对照引物对，所述引物组能快速、方便、高效地检测外源和内源FeLV，特异性好，灵敏度高。对临床检测和流行病学调查的开展具有指导意义，为宠物市场的安全发展提供一定的保障。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，涉及一种检测猫白血病病毒的引物对、引物组、试剂盒及应用。

背景技术

猫白血病病毒(FeLV)是肿瘤病毒亚科的一种反转录病毒，能导致猫白血病，持续感染可引起严重的免疫抑制、严重非再生性贫血及肿瘤等。FeLV有FeLV-A、FelV-B、FeLV-C和FeLV-T四个亚型。A型几乎存在于所有FeLV感染猫中，可以导致严重的免疫抑制。B型存在于大约50％FeLV感染猫中，可以引起肿瘤。C型仅存在于约1％FeLV感染猫中，可导致严重的贫血。若感染机体后不发生免疫反应，病毒可能会导致持续的病毒血症(40％)成为病毒的携带者。病毒血症通常在FeLV感染2～4周后出现，大约50％患持续病毒血症的猫感染FeLV后在1年内死亡。

FeLV存在内源和外源之分，多以“前病毒”形式存在，猫内源性白血病病毒在临床上不致病，功能上很大程度上未知。猫内源性白血病病毒对分子生物学检测FeLV感染存在很大的干扰，很容易出现误诊。至今为止我国未曾有可区分外源和内源FeLV的方法或试剂盒。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种检测猫外源性白血病病毒(FeLV)的引物对，以外源性FeLV保守的3'LTR核苷酸序列为扩增区域，设计出所述引物对，具有灵敏度高、特异性好、方便检测等优点。

本发明的第二目的在于提供一种检测猫白血病病毒的引物组，所述引物组包括上述引物对及检测猫内源性白血病病毒的对照引物对，所述引物组能快速、方便、高效地检测外源和内源FeLV，特异性好，灵敏度高。

本发明的第三目的在于提供一种检测猫白血病病毒的试剂盒，其包括如上所述的引物对或引物组，具有包装良好、使用方便的优点。

本发明的第四目的在于提供如上所述的引物对或引物组或试剂盒在制备猫白血病病毒检测试剂中的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种检测猫外源性白血病病毒的引物对，所述引物对的上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1和2所示。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明所述的引物对或引物组通过了对该引物的特异性、敏感性和重复性的试验，证实此引物能用于快速、方便、高效地检测猫白血病病毒，且特异性好，灵敏度高。

(2)本发明发现猫白血病病毒的内源和外源序列在LTR上的碱基序列不同，内源和外源FeLV均含有编码糖蛋白的gp70基因序列。通过参考与比对GenBank中所有FeLV的LTR和gp70基因序列，分别选择外源性FeLV特异性的3'LTR核苷酸序列和内源性FeLV gp70的保守序列作为扩增区域，设计了两对检测猫外源性和内源性白血病病毒的PCR引物。可减少猫内源性白血病病毒对分子生物学检测FeLV感染存在的干扰，从而降低误诊率。

(3)对于临床检测和流行病学调查的开展具有指导意义，为宠物市场的安全发展提供一定的保障。

附图说明