[发明专利]一种利用液质联用技术检测蛋白粉的磷脂的方法

权利要求书

1.一种利用液质联用技术检测蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，包括：

步骤1、单独配制磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇的梯度浓度的工作标准液，采用HPLC-MS/MS联用技术检测，以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线；

其中，HPLC系统条件为：

以C4色谱柱为固定相，以甲醇和乙腈为流动相A的有机相、以含乙酸铵的水溶液为流动相A的水相，以含乙酸铵的异丙醇为流动相B进行梯度洗脱；其中，所述流动相A相中，所述甲醇：所述乙腈：所述含乙酸铵的水溶液的体积比为1：1：3；其中含乙酸铵的浓度为5mmol/L；

所述流动相B相中，所述异丙醇中含5mmol/L的乙酸铵；所述梯度洗脱的程序为0.5 min20% B，1.5 min 40% B，3.0 min 60% B，13.0 min 98% B，13.1 min 20% B，17.0 min 20%B；

步骤2、取待测样品用溶剂超声波提取，离心，过滤获得供试品溶液，按照步骤1中HPLC-MS/MS联用技术检测，得到的检测结果代入到所述标准工作曲线中获得待测样品中磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸或磷脂酰肌醇的浓度，其中，待测样品包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇；采用HPLC-MS/MS联用技术检测采用ESI中性丢失模式分析；

当检测所述待测样品的磷脂酰乙醇胺时，ESI中性丢失模式的扫描范围为600-800；当检测所述待测样品的磷脂酰丝氨酸时，ESI中性丢失模式的扫描范围为600-950；当检测所述待测样品的磷脂酰肌醇时，ESI中性丢失模式的扫描范围为840-940。

2.根据权利要求1所述的利用液质联用技术检测蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，所述C4色谱柱的柱温为30-50℃。

3.根据权利要求1所述的利用液质联用技术检测蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，所述HPLC的流速为0.3-0.6mL/min。

4.根据权利要求1所述的利用液质联用技术检测蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，所述溶剂包括三氯甲烷和甲醇；所述三氯甲烷：所述甲醇的体积比为1:1。