[发明专利]一种拉莫三嗪胶体金试纸条的制备方法

说明书

一种拉莫三嗪胶体金试纸条的制备方法，包括金标垫与样品垫的预处理、胶体金喷点到金标垫、抗原喷点到NC膜。本发明制得的拉莫三嗪胶体金试纸条具有检测灵敏度高的优点。

技术领域

本发明涉及一种拉莫三嗪胶体金试纸条的制备方法，属于生物检测技术领域。

背景技术

拉莫三嗪为苯三嗪类抗癫痫药，具有广谱、安全、高效的特点，对多种癫痫发作和癫痫综合征均有良好疗效。

胶体金是一种常用的标记技术，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。

1971年Faulk和Taytor将胶体金引入免疫化学，此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法和快速免疫金渗滤法，用于检测HBsAg、HCG和抗双链DNA抗体等，具有简单、快速、准确和无污染等优点。

胶体金是由氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。

胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

胶体金标记，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合，因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。

发明内容

有鉴于此，本发明提出一种拉莫三嗪胶体金试纸条的制备方。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案是：一种拉莫三嗪胶体金试纸条的制备方法，包括：

样品垫的制备：将玻璃纤维或聚酯纤维用样品垫处理液浸泡，然后取出脱水，接着将样品垫放入干燥箱内，烘干至湿度为19~21%得到样品垫；

金标垫的制备：将玻璃纤维或聚酯纤维用金标垫处理液浸泡，然后取出脱水，接着将金标垫放入干燥箱内，烘干至湿度为19~21%，再在相对湿度为20-40％，室温条件下，用BIODOT仪器的AIRJET喷头将拉莫三嗪单克隆抗体-胶体金标记物均匀喷涂在所述金标垫上，喷点参数为4~6ul/cm²；然后置于37℃条件下干燥, 至湿度为19~21%；

反应膜的制备：用磷酸缓冲液将拉莫三嗪半抗原-卵清蛋白偶联物稀释，用划膜仪将其包被于硝酸纤维素膜上形成检测线，用磷酸盐缓冲液将羊抗鼠抗抗体稀释，用划膜仪将其包被于硝酸纤维素膜上形成质控线C，将包被好的反应膜置于37 ℃条件下干燥2 h；

将样品垫、金标垫、反应膜、吸水垫依次按顺序粘贴在PVC背板上；金标垫从起始端有一定区域被样品垫覆盖，金标垫的末端与反应膜的始端连接，反应膜的末端与吸水垫的始端相连，样品垫的始端与PVC背板的始端对齐，吸水垫的末端与PVC背板的末端对齐；所述反应膜的检测线和质控线均呈与所述试纸条的长度相垂直的条状带；检测线位于金标垫的末端的一侧；质控线位于远离金标垫的末端的一侧。