[发明专利]一种葡萄籽原花青素提取物的制备方法

说明书

本发明公开了一种葡萄籽原花青素提取物的制备方法，步骤如下：将葡萄籽粉碎，用石油醚脱脂，干燥后置于三角瓶中，加入缓冲液，酶解1.5‑2.5h后迅速升温充分灭活，离心分离并保存上清液，加入体积分数为65‑75%的乙醇溶液水浴45‑55min，抽滤，减压蒸馏，浓缩物经冷冻干燥得GSPE粗提物；在锥形瓶中加入AB‑8大孔树脂，再加入GSPE粗提物水溶液，放入摇床中振荡吸附47‑49h，过滤，蒸馏水冲洗过的树脂倒入体积分数为50‑60%的乙醇中解吸25‑27h，滤出解析液，减压蒸馏，冷冻干燥即得。该方法简便、快捷，成功制备了大量葡萄籽原花青素提取物，具有显著的抗氧化活性，可用于药品制备。

技术领域

本发明涉及一种葡萄籽原花青素提取物的制备方法。

背景技术

我国葡萄资源较为丰富，年产量约有近600万t，这些葡萄中约有80%用于酿酒，13%作为鲜果食用，7%用于加工果汁及其他葡萄产品。工业酒的生产伴随着大量的垃圾，全世界每年生产出数以万吨计酿酒葡萄废弃物，其中主要包括葡萄皮、葡萄籽等。随着葡萄酒市场的不断壮大，随之产生的酿酒副产物逐渐变成了一个不可忽视的环境问题。大多数企业一般是将皮籽丢弃、用作饲料、烧材或发酵后作为肥料，利用率很低，造成了极大的资源浪费。

近年来的研究发现，葡萄籽具有很高的营养价值和药用价值，其中所含的原花青素为葡萄籽生物活性的重要成分之一。葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidinextract，GSPE）是由儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯通过C4-C6或C4-C8键共价相连组成的多聚体。由于这类物质的分子中具有多电子的羟基部分，使它拥有较强的抗氧化、清除自由基和抑制脂质过氧化的能力，是目前发现的最强效的氧自由基消除剂和脂质过氧化抑制剂之一。

发明内容

本发明的目的在于提供一种葡萄籽原花青素提取物的制备方法。

本发明通过下面技术方案实现：

一种葡萄籽原花青素提取物的制备方法，包括如下步骤：将15-25份葡萄籽粉碎，用70-80份石油醚在60-70℃下脱脂5-7h，干燥后置于三角瓶中，加入50-60份pH4.0的缓冲液，调节纤维素酶液活力至100U/mg，40-44℃酶解1.5-2.5h后迅速升温至94-96℃充分灭活，2000r/min离心分离并保存上清液，加入90-100份体积分数为65-75%的乙醇溶液于54-56℃水浴45-55min，抽滤，55-65℃减压蒸馏浓缩至没有液滴滴出，浓缩物经冷冻干燥得GSPE粗提物；在锥形瓶中加入10-20份AB-8大孔树脂，再加入50-60份浓度为2mg/mL的GSPE粗提物水溶液，放入25-30℃摇床中振荡吸附47-49h，振荡速度为150r/min，过滤除去未吸附的GSPE粗提物水溶液，蒸馏水冲洗过的树脂倒入75-85份体积分数为50-60%的乙醇中，25-35℃、150r/min条件下下解吸25-27h，滤出解析液，55-65℃减压蒸馏浓缩至没有液滴滴出，冷冻干燥即得；各原料均为重量份。

优选地，所述的制备方法中，用75份石油醚在65℃下脱脂6h。

优选地，所述的制备方法中，42℃酶解2h后迅速升温至95℃充分灭活。

优选地，所述的制备方法中，加入95份体积分数为70%的乙醇溶液于55℃水浴50min。

优选地，所述的制备方法中，60℃减压蒸馏浓缩至没有液滴滴出。

优选地，所述的制备方法中，放入28℃摇床中振荡吸附48h。

优选地，所述的制备方法中，30℃、150r/min条件下下解吸26h。

本发明技术效果：

该方法简便、快捷、易操作，成功制备了大量葡萄籽原花青素提取物，具有显著的抗氧化活性，可用于药品制备。

具体实施方式