[发明专利]大豆蛋白的应用有效
| 申请号： | 201810749922.0 | 申请日： | 2018-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN108866031B | 公开（公告）日： | 2020-06-30 |
| 发明（设计）人： | 刘昀;张凛松;郑易之;孙楠;谭芳美;吴佳辉;程华 | 申请（专利权）人： | 深圳大学 |
| 主分类号： | C12N9/96 | 分类号： | C12N9/96;C12N15/29;C12N15/70;C07K14/415 |
| 代理公司： | 深圳市恒申知识产权事务所(普通合伙) 44312 | 代理人： | 袁文英 |
| 地址： | 518060 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大豆蛋白 应用 | ||
1.一种大豆蛋白的应用，其特征在于，所述大豆蛋白用于制备冻存LDH酶的保护剂；其中，所述大豆蛋白的编码序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大豆蛋白的制备方法包括如下步骤：
扩增所述大豆蛋白的编码序列；
构建包含所述编码序列的重组质粒；
将所述重组质粒转化至感受态细胞，进行诱导表达；
将诱导表达后的菌液进行蛋白分离纯化，得到所述大豆蛋白。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，扩增所述大豆蛋白的编码序列的引物对如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；和/或
扩增所述大豆蛋白的编码序列的模板为大豆胚根cDNA。
4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述重组质粒由蛋白表达载体PET-28a与所述大豆蛋白的编码序列重组得到。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述重组质粒的制备步骤包括：将所述蛋白表达载体PET-28a经Nde I和Xho I双酶切处理，然后利用T4连接酶将酶切产物与所述大豆蛋白的编码序列连接。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，将所述大豆蛋白的编码序列与双酶切处理的所述蛋白表达载体PET-28a按照摩尔比10:1混合进行连接。
7.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述感受态细胞为大肠杆菌BL21 Star感受态细胞。
8.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述诱导表达的步骤包括：将含有所述重组质粒的感受态细胞扩大培养，然后加入1‰IPTG的贮存液，在16℃下150rmp诱导。
9.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述蛋白分离纯化的步骤包括镍离子亲和层析。
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