[发明专利]一种用于产气肠杆菌检测的实时荧光定量PCR试剂盒有效
| 申请号： | 201810737814.1 | 申请日： | 2018-07-06 |
| 公开（公告）号： | CN108866215B | 公开（公告）日： | 2022-02-08 |
| 发明（设计）人： | 车团结;徐红;陈游;沈颂东;李亚鹏;高恺 | 申请（专利权）人： | 苏州百源基因技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 兰州中科华西专利代理有限公司 62002 | 代理人： | 李艳华 |
| 地址： | 215163 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 产气肠杆菌 检测 实时 荧光 定量 pcr 试剂盒 | ||
1.一种用于产气肠杆菌检测的实时荧光定量PCR试剂盒，包括
PCR反应液，由12mM Tris-HCl、100mM KCl、0.12%Triton X-100、0.12% 胆酸钠、0.6mg/mL BSA、1.8mM MgCl2、50nM dNTP、500nM上游引物、500nM下游引物、300nM Taqman探针组成；
其中上游引物序列为5'-CGCTGTACGCTTCATCTATT-3'；下游引物序列为5'-GACGCTGTATGCCGAGGTT-3'；探针序列为5'-TTCCCTTTGCCTAACATATCTACCGTTT-3'；
酶混合液，由5U/µL Taq DNA聚合酶，50%甘油，20mM Tris-HCl，100mM KCl，0.1mMEDTA，1mM DTT，0.5% Tween®20和0.5% NP-40组成；
产气肠杆菌Cad基因标准品，由1.00×108copies/ml、1.00×107copies/ml、1.00×106copies/ml、1.00×105copies/ml的重组质粒组成；
其中Cad基因标准品序列为5'-CGCTGTACGCTTCATCTATTTTCCCTTTGCCTAACATATCTACCGTTTTTATCTGGTAGAAAATCGCCATATCTTTAATGCCGGGCATTTTACCTACTTTTTCAACCTCGGCATACAGCGTC-3'；
阴性对照品，由水组成；
阳性对照品，由1.00×107copies/ml的重组质粒组成。
2.如权利要求1所述的一种用于产气肠杆菌检测的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：所述探针中5'端标记的荧光报告基团为FAM、TET、JOE、HEX、VIC中的一种，3'端标记的荧光淬灭基团为BHQ、DABCYL、TAMRA中的一种。
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