[发明专利]一种采用毛细管电泳-质谱联用分析鉴定落叶松中二氢槲皮素的方法

权利要求书

1.一种使用毛细管电泳-质谱联用法检测落叶松中二氢槲皮素的方法，其特征为，所述方法包括的步骤为：

(1)制备纯品二氢槲皮素的标准溶液，在毛细管电泳仪中进样，在质谱仪中分析，获得所述纯品二氢槲皮素的质谱图；其中所述纯品二氢槲皮素以甲醇为溶剂，配制梯度浓度的二氢槲皮素标准溶液；所述在毛细管电泳中进样为20mbar进样2s，15-30kV条件下进行电泳，紫外波长选择214nm，柱温为20-35℃，缓冲盐为乙酸铵溶液；质谱条件为阳离子模式，MS/MS全扫描，氮气流速15psi，氦气7psi，气体温度为300℃，分离电压3.0kV，鞘流液使用含0.01％醋酸铵的50％的甲醇溶液，流量为100nL/min,泵流速为0.4L/min，分流比为100:1；

(2)根据步骤(1)中质谱图的峰面积进行积分计算，绘制标准曲线和计算最低检测限；

(3)将样品二氢槲皮素和一份纯品二氢槲皮素按照步骤(1)的参数在毛细管电泳仪中进样，在质谱仪中分析，获得质谱图，并计算加样回收率：其中所述样品二氢槲皮素包括配制好的落叶松植物样品一份，和添加本步骤所述纯品二氢槲皮素的落叶松样品一份，根据得到的所述质谱图计算质谱峰面积，采用步骤(2)中标准曲线公式计算所述质谱峰面积所对应的进样量，分别记为纯品二氢槲皮素S₀、植物样品S₁、添加纯品二氢槲皮素的植物样品S₂，回收率公式为(2S₂-S₁)/S₀×100％；

(4)根据步骤(3)中质谱图中质谱峰与特征子离子信息，对所述落叶松中二氢槲皮素进行鉴定，其中所述特征子离子信息为母离子质荷比为305、子离子荷质比为153和258；

(5)根据所述标准曲线对所述落叶松中二氢槲皮素进行定量分析。

2.根据权利要求1所述的方法，所述步骤(1)中纯品二氢槲皮素的梯度浓度为2000、1000、500、250、125μg/mL，采用Chemstation软件对峰面积进行积分计算。

3.根据权利要求1所述的方法，所述步骤(1)中毛细管电泳的电压为20kV，柱温为25℃，乙酸铵浓度为20mmol。

4.根据权利要求1所述的方法，所述步骤(3)中所述纯品二氢槲皮素的浓度为0-2mg/mL。

5.根据权利要求4所述的方法，所述步骤(3)中所述纯品二氢槲皮素的浓度为125μg/mL。