[发明专利]一种兼性氮化碳亲水性富集材料及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种兼性氮化碳亲水性富集材料，为：L-Cys-Au@M-C₃N₄，其中，L-Cys-Au表示结合金的L-半胱氨酸，M-C₃N₄表示薄层石墨相氮化碳；

所述兼性氮化碳亲水性富集材料具有片层结构，片层薄，且分散均匀，表面兼性亲水官能团丰富。

2.制备权利要求1所述的兼性氮化碳亲水性富集材料的方法，包括：

1)将三聚氰胺固体煅烧后均化处理，得到石墨相氮化碳粉末；

2)将所述石墨相氮化碳粉末分散于水中得到g-C₃N₄分散液，微波反应，离心，收集上层悬浮液，得到水相分散的薄层石墨相氮化碳分散液；

3)向所述薄层石墨相氮化碳分散液中加入金源，充分混合，离心分离收集固体；将所述固体分散至水中，加入还原剂，搅拌下反应，收集固体，得到载金的薄层石墨相氮化碳；

4)将上述载金的薄层石墨相氮化碳分散于有机溶剂中，加入L-半胱氨酸，搅拌下反应，离心分离，收集固体，得到兼性氮化碳亲水性材料。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)中，所述煅烧的温度为500-700℃，时间为1-4h，

所述煅烧过程中的升温速率为1-5℃/min。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：步骤2)中，所得g-C₃N₄分散液的浓度为1-3mg/mL，g-C₃N₄分散液的总体积不超过300mL；

所述微波反应在95℃温控微波反应器中进行；

所述微波反应在搅拌条件下进行，具体可在200W磁力搅拌条件下进行；

所述微波反应的时间为8-14h。

所述离心的条件为：1000转/min离心2min。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法，其特征在于：步骤3)中，所述金源选自：HAuCl₄；

所述薄层石墨相氮化碳分散液中薄层石墨相氮化碳与金源的配比为：1-4μmol：1g；

所述金源以金源溶液的形式加入；

所述金源为HAuCl₄时，以10-40mM的HAuCl₄溶液的形式加入；

所述还原剂选自：NaBH₄、氨硼烷、水合肼；

所述反应的时间为0.5-2h。

6.根据权利要求2-5中任一项所述的方法，其特征在于：步骤4)中，所述有机溶剂为甲醇；

所述L-半胱氨酸以L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液的形式加入；

所述L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液中，甲醇与乙酸体积比为6:1；

所述L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液中L-半胱氨酸的浓度为20-80mM；

所述载金的薄层石墨相氮化碳与所述L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液中L-半胱氨酸的配比为2-8μmol：1g；

所述L-半胱氨酸在搅拌条件下加入；

所述反应的时间为4-6h。

7.权利要求1中所述的兼性氮化碳亲水性富集材料在生物样本中糖肽的选择性富集与分离中的应用。

8.一种选择性富集与分离生物样本中糖肽的方法，包括：

将权利要求1中所述的兼性氮化碳亲水性富集材料与肽样品接触富集，用冲洗非糖肽的流动相冲洗，离心去除非糖肽，最后用洗脱糖肽的流动相将富集的糖肽洗脱下来，即可。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：

冲洗非糖肽的流动相为水、乙腈和三氟乙酸混合溶液，其中，水：乙腈：三氟乙酸体积比可为：10-30：70-90：0.2；

洗脱糖肽的流动相为0.1％的三氟乙酸溶液；

所述肽样品的样品浓度为0.1ng/mL-1mg/mL，富集的温度为室温。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述肽样品来源包括组织、血液、尿液等生物样品中的蛋白或者糖蛋白标准品中的一种或多种蛋白混合。