[发明专利]一种氨基酸脱氢酶突变体及其制备方法和应用有效
申请号: | 201810675947.0 | 申请日: | 2018-06-27 |
公开(公告)号: | CN108795893B | 公开(公告)日: | 2021-10-08 |
发明(设计)人: | 卢江平;张娜;焦学成;李瑞;张克俭;张瑜;杨益明 | 申请(专利权)人: | 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 300457 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氨基酸 脱氢酶 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种氨基酸脱氢酶突变体,其特征在于,其为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的41至301位氨基酸经取代一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列;
其中,所述突变体具有氨基酸脱氢酶的活性;
所述突变体的突变位点为L294A;
或者,所述突变体的突变位点为M66A和L294A的组合,F77V和L294A的组合,Y112F和L294A的组合,Y112V和L294A的组合,G114A和L294A的组合,A135L和L294A的组合,A135V和L294A的组合,A135F和L294A的组合,L294A和V297A的组合,L294A和L301A的组合,M66A、A135F和L294A的组合,F77V、Y112F和L294A的组合,F77A、A135F和L294A的组合,Y112F、G114A和L294A的组合,G114A、A135F和L294A的组合,或M66A、F77A、A135F和L294A的组合中的任意一种。
2.编码如权利要求1所述的氨基酸脱氢酶突变体的核苷酸序列。
3.一种表达载体,其特征在于,所述表达载体含有至少一个拷贝的如权利要求2所述的核苷酸序列。
4.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞含有权利要求3所述的表达载体。
5.一种制备如权利要求1所述的突变体的方法,其特征在于,包括:
(1)制备重组宿主细胞,其中所述细胞包含DNA分子,所述DNA分子包含编码根据权利要求1所述突变体的核酸序列;
(2)在适合表达所述突变体的培养基中孵育所述宿主细胞;
(3)从所述培养基中回收步骤(2)中由所述宿主细胞表达的所述突变体的多肽。
6.一种组合物,其特征在于,所述组合物包括如权利要求1所述的突变体的多肽。
7.根据权利要求6所述的组合物,其特征在于,所述组合物为干粉、片剂或液体中的任意一种或至少两种的组合。
8.一种如权利要求1所述的突变体在催化氧化脱氨和/或还原氨化反应中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述应用为所述突变体在催化还原脱氨反应中的应用。
10.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述应用为所述突变体在制备手性药物前体中的应用。
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