[发明专利]一种检测抗烟草花叶病毒Np基因的分子标记及其应用

权利要求书

1.一种抗烟草花叶病毒Np基因的分子标记，其特征在于，所述分子标记的序列如SEQID No.1所示。

2.一种检测抗烟草花叶病毒Np基因的方法，其特征在于，使用特异性引物对待测植株进行PCR扩增，根据扩增产物是否含有权利要求1所述分子标记来判断植株是否含有Np基因。

3.一种权利要求2所述检测抗烟草花叶病毒Np基因的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）提取植株叶片DNA；

（2）以DNA为模板，利用特异性引物对进行PCR扩增，PCR体系为：1×PCR Buffer，0.25mmol/L dNTPs， 2.0 mmol/L MgCl₂，50 ng模板DNA，正反向引物各0.75 μmol/L，1 U TaqDNA聚合酶；PCR反应条件：94 ℃预变性2 min；94 ℃变性60 sec，55 ℃复性1 min，72 ℃延伸1 min，30个循环；最后72 ℃延伸5 min；

（3）扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离检测；

（4）根据电泳结果判断待测植株是含有Np基因。

4.一种权利要求1所述分子标记的特异性引物对，其特征在于，所述特异性引物对的正向引物序列如SEQ No.2所示，反向引物序列如SEQ No.3所示。

5.一种权利要求1所述分子标记的应用，其特征在于，筛选新的抗烟草花叶病毒植物种质资源，利用新的种质资源培育新的抗病品种。

6.一种检测权利要求1所述分子标记的试剂盒。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求4所述的特异性引物对。