[发明专利]一种高产虾青素发酵培养基的配方技术及应用

权利要求书

1.一种高产虾青素发酵培养基在红法夫酵母发酵以制备虾青素中的应用，具体为：将发酵培养基置于发酵罐中，接种入3-6%种子液，控制温度为23-25℃、通气量为3-5L/min，通过调节搅拌转速控制溶氧值在40-60%之间，恒温发酵5-7天即可；

所述发酵12-18小时时依次往培养基中添加0.2-0.25mg/L t-亮氨酸叔丁酯、0.025-0.030mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.02-0.022mg/L吲哚乙酸、0.01-0.015mg/L β-萘氧乙酸；

所述发酵培养基的成分及其含量为：葡萄糖28-30g、酵母膏5-6g、中药膏剂8-10g、五水合柠檬酸钠12-15g、磷酸氢二钾20-25g、无水硝酸按8-10g、七水合硫酸镁0.5-1g、二水合氯化钙0.2-0.5g、微量元素溶液0.4-0.5mL、生物素溶液0.2-0.25mL、氯仿0.015-0.02mL，以蒸馏水补齐1000mL；

所述中药膏剂的制备步骤为：将防风、黄芪、大黄、杏鲍菇、连翘按照干物质质量比0.2-0.5:0.5-0.8:1-1.5:1:0.5-0.8的比例混合，粉碎并过筛，加水煎煮至膏剂密度为1.2-1.5g/mL，加入2-4倍的水，调节pH至2.8-3.4，在35-40℃温度下，加入底物5-8%的混合酶，酶解2-4小时后沸水浴10-20分钟灭酶，10000-12000r/min离心后取悬浮液与清液，低温制膏至密度为1.1-1.2g/mL即得中药膏剂；所述中药膏剂的制备步骤中的混合酶为质量比为1:0.5-1:0.2-0.4:0.5-0.6的胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、葡聚糖酶、木聚糖酶；

所述微量元素溶液为：将9-10mg无水硼酸、15-25mg硫酸锰、55-58mg五水合硫酸铜、1.95-2.00mg碘化钾、5-6mg氯酸铵、140-150mg六水合氯化铁、5-8mg钼酸铵、400-500mg七水合硫酸锌，溶解于5mL蒸馏水中配制而成的溶液；

所述生物素溶液为：将1.0-1.2mg的生物素溶解在55-60mg的乙醇中，加蒸馏水至体积100mL。

2.根据权利要求1所述的一种高产虾青素发酵培养基在红法夫酵母发酵以制备虾青素中的应用，其特征在于：所述发酵培养基的成分及其含量为：葡萄糖29g、酵母膏5g、中药膏剂8-9g、五水合柠檬酸钠13-14g、磷酸氢二钾22-24g、无水硝酸按9-10g、七水合硫酸镁0.7-0.8g、二水合氯化钙0.3-0.5g、微量元素溶液0.4-0.5mL、生物素溶液0.22-0.25mL、氯仿0.016-0.018mL，以蒸馏水补齐1000mL。

3.根据权利要求1所述的一种高产虾青素发酵培养基在红法夫酵母发酵以制备虾青素中的应用，其特征在于：所述发酵培养基的成分及其含量为：葡萄糖29g、酵母膏5g、中药膏剂9g、五水合柠檬酸钠14g、磷酸氢二钾23g、无水硝酸按9g、七水合硫酸镁0.8g、二水合氯化钙0.4g、微量元素溶液0.45mL、生物素溶液0.24mL、氯仿0.016mL，以蒸馏水补齐1000mL。

4.根据权利要求1所述的一种高产虾青素发酵培养基在红法夫酵母发酵以制备虾青素中的应用，其特征在于：所述红法夫酵母发酵后的生物量含量能达到15.8-22.2g/L，虾青素含量可达100.0-120.0mg/L。

5.根据权利要求1所述的一种高产虾青素发酵培养基在红法夫酵母发酵以制备虾青素中的应用，其特征在于：所述在发酵进行至0小时时，往发酵培养基中添加8g/L60%的乙醇溶液，乙醇溶液中还含有3.3‰的莰烷酸。