[发明专利]一种草甘膦固态降解菌剂的制备方法在审
| 申请号： | 201810657630.4 | 申请日： | 2018-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN108728386A | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 郭利民;刘银松 | 申请（专利权）人： | 荆门市拓达科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 448000 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 草甘膦 制备 生物炭 半固体培养基 高效降解菌 降解菌剂 生产成本低 稻壳热解 高效降解 恒温培养 环境友好 污染土壤 固定的 降解菌 灭菌 甘膦 活化 菌种 种草 残留 农作物 调解 农药 生产 土壤 | ||
1.一种草甘膦固态降解菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)菌种活化。将保存于-80℃的菌种取出解冻，取适量涂布于以草甘膦为唯一碳源的固体MSM(Minimal Salt Media)培养基上，28℃恒温培养24h。挑取单菌落接种于5mL液体LB培养基中，180rpm震荡培养24h备用。
(2)生物炭制备。将稻壳经水洗两次后，烘干、粉碎，250-650℃限氧条件下在管式炉中热解，冷却至室温，研磨过0.45mm筛，得生物炭。
(3)半固体培养基制备。生物炭、LB培养基、蒸馏水按比例混合均匀，调节pH为7.0，高温高压灭菌。
(4)共培养制备草甘膦固态降解菌剂。取步骤(1)活化的菌液，接种于步骤(3)的半固体培养基中，混匀。恒温震荡培养，然后通风风干至菌剂含水量低于30％，得草甘膦固态降解菌剂。
2.根据权利要求1所述的草甘膦固态降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中MSM培养基中草甘膦浓度为400mg/L。
3.根据权利要求1所述的草甘膦固态降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中管式炉中热解时间为2h。
4.根据权利要求1所述的草甘膦固态降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中生物炭、LB培养基、蒸馏水比例为1:2:2-4，调节pH所用溶液为1M NaOH。
5.根据权利要求1所述的草甘膦固态降解菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(4)中恒温震荡培养是指28℃、180rpm震荡培养24-48h，至半固体培养基中菌体数目达108-109数量级。
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