[发明专利]一种用于判断前列腺疾病的标志物及其应用在审
| 申请号: | 201810648571.4 | 申请日: | 2018-06-22 |
| 公开(公告)号: | CN108624691A | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
| 发明(设计)人: | 董学森;李一男 | 申请(专利权)人: | 杭州西合精准医疗科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6883;C12N15/11 |
| 代理公司: | 常州易瑞智新专利代理事务所(普通合伙) 32338 | 代理人: | 徐琳淞 |
| 地址: | 310000 浙江省杭州市萧山*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 前列腺癌 前列腺疾病 环状RNA 标志物 前列腺病变 风险评估 应用 试剂盒使用 体液样本 灵敏度 试剂盒 检测 取样 血液 痛苦 治疗 | ||
1.用于判断前列腺疾病的标志物,为前列腺癌特异环状RNA,其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
2.如权利要求1所述的标志物,其还包括内参照,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求1或2所述的标志物,用于判断的所述前列腺疾病包括前列腺癌,前列腺增生,前列腺炎症。
4.如权利要求1或2所述的标志物,其用作前列腺癌的早期诊断标志物以及用于PSA检测阳性患者的前列腺病变性质判断以及前列腺癌风险评估。
5.一种用于检测权利要求1所述的标志物的检测试剂,其特征在于:所述前列腺癌特异环状RNA的检测试剂包括SEQ ID NO.3-8和SEQ ID NO.9-14所示的检测引物对和核苷酸序列如SEQ ID NO.15-19所示的任意一类Taqman探针。
6.一种用于检测权利要求2所述的标志物的检测试剂,其特征在于:所述内参照定量检测试剂包括如SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.21所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ IDNO.22所示的Taqman探针。
7.如权利要求1或2所述的标志物在制备前列腺癌病变检测试剂盒中的应用。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于:通过包括荧光PCR法,高通量测序法,Northern印迹法以及原位杂交法的方法获得如权利要求1或2所述的标志物在样本中的表达量。
9.如权利要求7所述的应用,其特征在于:所述试剂盒包括对照品,所述对照品分为阳性对照和阴性对照,阴性对照为无前列腺癌特异环状RNA含内参照的总RNA样品,阳性对照为含有前列腺癌特异环状RNA以及内参照的总RNA样品。
10.如权利要求8所述的应用,其特征在于:所述试剂盒还包括PCR反应缓冲液、逆转录反应缓冲液、随机引物、dNTP、DTT、Taq酶以及逆转录酶。
11.如权利要10所述的应用,其特征在于:用于分别扩增前列腺癌特异环状RNA与内参照的PCR扩增反应体系,每10ulPCR扩增反应体系终浓度组成为:前列腺癌特异环状RNA或内参照特异性引物50-200nΜ和用于检测扩增产物的特异性Taqman荧光探针20-100nΜ,2XPCR缓冲液5ul。
12.如权利要求10所述的应用,其特征在于:所述试剂盒还包括RNA萃取试剂和萃取装置。
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