[发明专利]用于检测绿僵菌植物内生性的绿色荧光蛋白标记基因egfp特异性引物、试剂盒及方法在审
| 申请号： | 201810648106.0 | 申请日： | 2018-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN108913796A | 公开（公告）日： | 2018-11-30 |
| 发明（设计）人： | 农向群;蔡霓;王峰;王广君;曹广春;涂雄兵;张泽华 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 100093 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 绿僵菌 绿色荧光蛋白标记 特异性引物 基因egfp 试剂盒 验证 农业技术领域 荧光蛋白基因 合成绿色 共生性 灵敏度 植物根 专属性 检测 绿浆 | ||
1.用于检测绿僵菌植物内生性的绿色荧光蛋白标记基因egfp特异性引物，其特征在于，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列为5'-AGTCAGTCTCCCTTGCGGTT；所述下游引物的核苷酸序列为5'-TGGGTGCTCAGGTAGTGGTT。
2.根据权利要求1所述的绿僵菌植物内生性的绿色荧光蛋白标记基因egfp特异性引物，其特征在于，所述植物为玉米或羊草。
3.检测绿僵菌在植物中内生性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的用于检测绿僵菌植物内生性的绿色荧光蛋白标记基因egfp特异性引物，以及绿色荧光蛋白标记基因egfp。
4.检测绿僵菌植物内生性的方法，其特征在于，所述方法包括利用权利要求1所述的用于检测绿僵菌植物内生性的绿色荧光蛋白标记基因egfp特异性引物扩增绿僵菌的绿色荧光蛋白标记基因egfp的步骤。
5.根据权利要求4所述的检测绿僵菌植物内生性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)将标记有绿色荧光蛋白基因egfp的绿僵菌孢子与植物共培养；
(2)采集植物样本，提取植物DNA；
(3)用权利要求1所述的用于检测绿僵菌植物内生性的绿色荧光蛋白标记基因egfp特异性引物扩增步骤(2)提取的植物DNA，判断是否得到特异性扩增结果。
6.根据权利要求5所述的检测绿僵菌植物内生性的方法，其特征在于，步骤(2)中，采集植物样本，并制作样本切片，在488nm下，检视样品切片中是否含有绿色荧光菌丝。
7.根据权利要求4所述的检测绿僵菌植物内生性的方法，其特征在于，所述植物为玉米或羊草。
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