[发明专利]增加同种异体T细胞移植相容性的方法及其应用

说明书

本发明涉及增加同种异体T细胞移植相容性的方法及其应用。通过该方法能够高效获得同时克服同种异体T和NK细胞排斥反应的T细胞。

技术领域

本发明涉及细胞治疗领域，特别涉及增加同种异体T细胞移植相容性的方法及其应用。

背景技术

CAR-T治疗

传统肿瘤治疗药物包括化疗药、靶向药，虽然它们在一定程度上提高了癌症患者的生存期，但同时也带来了严重的副作用，极大地降低了病人的生存质量。更不幸的是，大部分患者在接受这些传统治疗后仍旧会复发，而一旦复发，无药可救是大概率事件。

近年来，随着免疫治疗的发展，免疫检验点抑制剂药物(如:CTLA-4、PD-1/PD-L1抗体)的出现，彻底改变了肿瘤治疗的方式。但这类药物在不同癌症病人中的有效率只有20％-40％，仍然有大部分的癌症患者等待新的有效治疗方式的出现。

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)治疗技术是通过体外转导一个识别癌细胞的人工基因于人体T细胞上，使人T细胞具有特异杀伤肿瘤细胞的能力。CAR-T细胞治疗属于过继性免疫疗法(adoptive cell transfer,ACT)，它利用人体免疫细胞来对抗肿瘤，被称为“活体药物”。这种ACT疗法在近年已应用于临床实验当中，特别是在儿童白血病方面的有效探索，为研究者以及医生开辟了一条治疗肿瘤的新路径。2017年末，两款CAR-T药物获得美国FDA的许可上市，然而，这种ACT疗法仍旧处于其早期阶段。它与传统药物相比具有如下创新点：

首先，精确靶向肿瘤，且副作用可逆。CAR-T细胞治疗相比化疗药、靶向药具有更特异的肿瘤细胞杀伤能力。在输入病人体内后，虽然短时间内会产生细胞因子效应，但该副反应可控，病人在获得完全缓解的情况下基本上能和健康人一样生活。

其次，持续缓解时间长。CAR-T细胞部分属于记忆T细胞，在输入病人体内后能长期存在于病人身体中，时刻监视身体中是否出现肿瘤细胞，一旦有新的肿瘤细胞出现就会立刻将其杀灭。

虽然，自体CAR-T在我国已如火如荼地进行着临床研究以及产业化的进程，但因特殊的技术特点，其在商业化的道路上仍有一些障碍：

首先，价格高昂。“私人订制”式的生产导致高昂的价格，诺华上市的CD19CAR-T细胞制品Kymirah售价高达47.5万美金，风筝制药上市的Yescarta售价34.7万美金，对于中国患者是难以承受的负担。

其次，订制时间长。订制式的CAR-T细胞需要15～20天的培养时间，对于晚期恶性肿瘤患者，病情紧急，无法及时给药，病人可能在药品制备的等待中去世。

再次，具有使用限制自体CAR-T的制备非常依赖于病人自身的T细胞状态。对于经过多次化疗的病人，其T细胞并不适合用来制作CAR-T，其使用受到限制。据不完全统计，有10％左右的血液肿瘤患者其T细胞不具备订制自体CAR-T的条件，因此无法使用。

通用型CAR-T治疗

异体CAR-T细胞治疗，又称为通用CAR-T(Universal CAR-T,UCAR-T)细胞治疗，其取自健康人血液，提取T细胞，经过工程改造，回输给不同患者。通用型CAR-T是基于基因编辑、病毒转染技术与电转技术改造人体免疫T细胞而来的。它在已有T细胞上敲除某些基因，使得外来的健康人T细胞不会攻击患者体内细胞引起抗宿主排异反应(GvHD效应)，以及不会被患者免疫系统清除，从而存活在患者体内发挥肿瘤杀伤的作用。通用型CAR-T是摆放在货架的药物，因为它取自已有健康人T细胞，可按照生产药物的严格标准大规模量产。并且，每个不同CAR的靶点可针对不同癌症适应症，也可做到用不同通用型CAR-T治疗具有不同“分子标记”的肿瘤，极具多样性。通用型CAR-T相比较自体CAR-T，具备“摆在货架上(off-the-shelf)”的特点：