[发明专利]扩增子测序文库及其构建方法在审
| 申请号： | 201810631026.4 | 申请日： | 2018-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN108866051A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 陈璟;冯丹;张艳兵;秦楠 | 申请（专利权）人： | 上海锐翌生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6806;C40B80/00;C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 赵天月 |
| 地址： | 200050 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 测序文库 扩增子 测序 构建 测序引物序列 扩增引物序列 数据准确性 基底结合 扩增效率 依次相连 一步PCR 规模化 扩增 应用 | ||
1.一种测序接头，其特征在于，包括依次相连的基底结合序列、测序引物序列、内识别序列以及扩增引物序列。
2.根据权利要求1所述的测序接头，其特征在于，所述内识别序列具有SEQ ID NO：1～30任一所示的核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的测序接头，其特征在于，所述内识别序列与扩增引物序列之间进一步包括间隔序列，
任选地，所述间隔序列具有SEQ ID NO：31～37任一所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求1所述的测序接头，其特征在于，所述测序引物序列与内识别序列之间进一步包括连接序列，
任选地，所述连接序列具有SEQ ID NO：38和39任一所示的核苷酸序列。
5.根据权利要求1所述的测序接头，其特征在于，所述基底结合序列具有SEQ ID NO：40和41任一所示的核苷酸序列；
所述测序引物序列具有SEQ ID NO：42和43任一所示的核苷酸序列。
6.一种试剂盒，其特征在于，含有权利要求1～5任一项所述测序接头。
7.一种扩增子测序文库的构建方法，其特征在于，包括：
利用正向测序接头与反向测序接头对扩增子进行扩增，以便得到测序文库，
所述正向测序接头是如权利要求1～5任一项所述测序接头所限定的，其中扩增引物序列为正向引物，
所述反向测序接头是如权利要求1～5任一项所述测序接头所限定的，其中扩增引物序列为反向引物。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述扩增是一步进行的，
任选地，基于30μL的扩增体系，所述扩增体系包括：
15μL Polymerase Mix；
1μL所述正向测序接头；
1μL所述反向测序接头；
10ng所述扩增子；以及
余量的水。
9.一种测序方法，其特征在于，包括：
根据权利要求7或8所述扩增子测序文库的构建方法构建扩增子测序文库；以及
对所述测序文库进行测序。
10.一种扩增子测序文库，其特征在于，是通过权利要求7或8所述扩增子测序文库的构建方法得到的。
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