[发明专利]一种用于检测HPV的试剂盒

说明书

本发明提供了一种用于检测HPV的试剂盒，其包括扩增试剂；扩增试剂原料包括：HPV引物探针序列；保护剂，其包括海藻糖、蔗糖和棉子糖；灵敏度增强剂，其包括苏氨酸、牛血清白蛋白和TrisX‑100；扩增酶系，其包括重组酶、辅助酶、单键结合蛋白、聚合酶和内切酶；dNTPS。本发明可将核酸的提取和扩增检测在全封闭环境下一体化整合，高效简便，结果准确。

技术领域

本发明涉及一种用于检测HPV的试剂盒。

背景技术

以RPA恒温扩增技术为核心，将核酸自动提取过程与RPA恒温扩增检测过程，构建成为一体化的核酸提取与扩增检测系统，对于进一步提高核酸诊断分析效率，实现整个核酸诊断分析过程的自动化具有重要的现实意义。

中国专利申请201710318670.1公开了一种对生物样品中的HPV核酸进行检测的方法,其包含下述步骤：(i)分别用14种HPV型别的特异性引物对和探针组中的引物来扩增样品中的核苷酸片段。(ii)使来自步骤(i)的扩增的片段分别接触上述14种HPV型别基因的特异性引物对和探针组中的探针，(iii)检测探针释放的信号，判断生物样品中是否存在HPV以及HPV的类型。

中国专利申请201510026814.7公开了一种检测HPV的qPCR引物，该qPCR引物包括如下两类引物对：第一类引物对：能扩增出所有类型HPV基因组中保守序列的引物对；第二类引物对：能在同一管qPCR体系中检测出至少两种类型HPV的引物对。本发明还公开包含上述引物对的HPV检测试剂盒。

中国专利申请201510897921.7公开了一种HPV检测试剂盒及检测方法。该HPV检测试剂盒包括微载体、检测探针及扩增引物。

上述技术方案的缺陷在于：检测过程繁琐，多个环节需要增加手工操作；检测时间长；扩增试剂效率不高、灵敏度低、保存条件苛刻；检测过程开放，容易引起外部环境与检测试剂交叉污染。

因此，如何提供一种检测过程简便，检测时间短；扩增试剂高效灵敏、便于保存；检测过程封闭、可有效避免外部环境与检测试剂交叉污染的试剂盒成为了业界需要解决的问题。

发明内容

针对现有技术的缺点，本发明的目的是提供一种用于检测HPV的试剂盒，其检测过程简便，检测时间短；扩增试剂高效灵敏、便于保存；检测过程封闭、可有效避免外部环境与检测试剂交叉污染。

为了实现上述目的，本发明提供了一种用于检测HPV的试剂盒，试剂盒包括扩增试剂；扩增试剂原料包括：

HPV引物探针序列；

保护剂，保护剂包括海藻糖、蔗糖和棉子糖；

灵敏度增强剂，灵敏度增强剂包括苏氨酸、牛血清白蛋白和TrisX-100；

扩增酶系，扩增酶系包括重组酶、辅助酶、单键结合蛋白、聚合酶和内切酶；

dNTPS。

本发明中，扩增试剂原料各组分混合在一起，呈液态；经过冻干工艺处理后得到干粉状的扩增试剂。

本发明中，HPV引物序列包括：

F1:5’-CGTAAACGTTTACCATATTTTTTTTCAGATGTC-3’；

F2:5’-CGTAAACGTGTTCCCTATTTTTTTGCAGATGGC-3’；

R1:5’-TAATCCCGATACTTTAGGAACTAATATTTTGTTAT-3’；

R2:5’-TAATCCTGACACCTTTGGTACAACTATTTTTTTAGG-3’；

R3:5’-GTATGCAGAAACCTTAGGAATATCCTGCTTATTGCC-3’；