[发明专利]一种用于检测HBV-pgRNA的试剂盒有效
申请号: | 201810599643.0 | 申请日: | 2018-06-12 |
公开(公告)号: | CN108754022B | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 刘淑园;陈华云;张天海;王盼盼 | 申请(专利权)人: | 广州和实生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12M1/34;C12M1/00 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 朱本利 |
地址: | 510535 广东省广州市黄埔区高新技*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 hbv pgrna 试剂盒 | ||
1.一种用于检测HBV-pgRNA的试剂盒,其中,所述试剂盒包括扩增试剂;所述扩增试剂原料包括:
HBV-pgRNA引物探针序列;
保护剂,其包括海藻糖、蔗糖和棉子糖;
灵敏度增强剂,其包括苏氨酸、牛血清白蛋白和TrisX-100;
扩增酶系,其包括重组酶、辅助酶、单键结合蛋白、聚合酶和内切酶;
dNTPS;
所述试剂盒包括:
提取仓,其包括按照样本流向依次分布的裂解机构、洗涤机构和洗脱机构;所述裂解机构包括按照样本流向依次分布的磁性槽、裂解槽和结合槽;所述裂解机构内,相邻两槽之间设有可活动的隔断;所述裂解机构内设有裂解试剂和磁性物质;所述洗涤机构包括第一油槽和洗涤槽,所述洗涤槽内设有洗涤液;所述结合槽与所述第一油槽之间设有可活动的隔断;所述第一油槽位于所述裂解机构和所述洗涤槽之间;所述洗脱机构包括第二油槽和洗脱槽,所述洗脱槽内设有洗脱液;所述第二油槽位于所述洗涤槽和所述洗脱槽之间;所述第一油槽和所述第二油槽内均设有油相;相邻两槽之间设有可活动的隔断;所述裂解机构与所述第一油槽之间设有可活动的隔断;所述提取仓进一步包括缓冲液槽,所述缓冲液槽位于所述洗脱槽下游,且与所述洗脱槽之间设有可活动的隔断;所述第一油槽和所述洗涤槽之间设有可上下移动的密封片;所述第二油槽和所述洗脱槽之间设有可上下移动的密封片;所述裂解机构内,相邻两槽之间设有可脱落的固定卡片;所述结合槽与所述第一油槽之间设有可脱落的固定卡片;所述洗涤槽和所述第二油槽之间设有可脱落的固定卡片;所述洗脱槽与所述缓冲液槽之间设有可脱落的固定卡片;所述提取仓进一步包括弹性密封膜,所述弹性密封膜位于所述密封片与所述固定卡片下方,且被所述密封片与所述固定卡片压紧;
驱动机构,其包括可按照样本流向滑移的滑块;所述滑块上设有磁铁;所述滑块上设有用于顶起所述密封片或使所述固定卡片脱落的楔形块;
扩增管,其位于所述洗脱机构下游;所述扩增管与所述洗脱槽连通;所述缓冲液槽位于所述扩增管上游,且与所述扩增管相通。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其中,所述扩增试剂原料进一步包括反应平台,所述反应平台包括缓冲系统和供能系统;所述缓冲系统包括Tris-SO4(PH8.0)、KCl和MgCl2;所述供能系统包括ATP、磷酸肌酸和肌酸激酶。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其中,所述扩增试剂原料进一步包括聚乙二醇。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其中,所述扩增试剂原料通过冻干工艺处理,得到所述扩增试剂:所述冻干工艺包括:
步骤S1:将所述扩增试剂原料在-55℃环境下放置6h;
步骤S2:将所述扩增试剂原料在-35℃环境下放置12h;
步骤S3:将所述扩增试剂原料在-25℃环境下放置4h;
步骤S4:将所述扩增试剂原料在20℃环境下放置6h。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其中,所述裂解机构进一步包括位于所述磁性槽上游的样本槽,样本位于所述样本槽中;所述裂解试剂包括裂解增强剂和裂解结合液,分别设于所述裂解槽和所述结合槽内;所述磁性物质设于所述磁性槽内。
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