[发明专利]一种用于检测HIV-1的试剂盒

说明书

本发明提供了一种用于检测HIV‑1的试剂盒，其包括扩增试剂；扩增试剂原料包括：HIV‑1引物探针序列；保护剂，其包括海藻糖、蔗糖和棉子糖；灵敏度增强剂，其包括苏氨酸、牛血清白蛋白和TrisX‑100；扩增酶系，其包括重组酶、辅助酶、单键结合蛋白、聚合酶和内切酶；dNTPS。本发明可将核酸的提取和扩增检测在全封闭环境下一体化整合，高效简便，结果准确。

技术领域

本发明涉及一种用于检测HIV-1的试剂盒。

背景技术

以RPA恒温扩增技术为核心，将核酸自动提取过程与RPA恒温扩增检测过程，构建成为一体化的核酸提取与扩增检测系统，对于进一步提高核酸诊断分析效率，实现整个核酸诊断分析过程的自动化具有重要的现实意义。

中国专利200880122734.X公开了一种检测HIV抗原用试剂,其含有第一抗体、固相和第二抗体,其中第一抗体是用标记物标记了的识别HIV-1p24抗原的第一人单克隆抗体,第二抗体是与可结合到上述固相上的物质结合的识别HIV-1p24抗原的第二人单克隆抗体。

中国专利201510494301.9公开了一种人类免疫缺陷病毒HIV-1的定量检测试剂盒，包括：样本处理剂，包括异硫氰酸胍、柠檬酸钠、十二烷基肌酸钠、β-巯基乙醇和蛋白酶K；用于靶核苷酸扩增的上游引物HIV-F；用于靶核苷酸扩增的下游引物HIV-R；用于靶核苷酸检测的Taqman探针HIV-P，Taqman探针HIV-P的两端分别结合有荧光基团和荧光猝灭剂；以及RNA一步法反应缓冲液。

中国专利申请201510292408.5公开了一种HIV-1基因型和耐药突变位点的检测试剂盒及其应用。本发明的试剂盒包括检测待测HIV-1基因组的基因型和耐药突变位点的成套引物；所述成套引物包括扩增引物对和测序引物组。

上述技术方案的缺陷在于：

检测过程繁琐，多个环节需要增加手工操作；检测时间长；扩增试剂效率不高、灵敏度低、保存条件苛刻；检测过程开放，容易引起外部环境与检测试剂交叉污染。

因此，如何提供一种检测过程简便，检测时间短；扩增试剂高效灵敏、便于保存；检测过程封闭、可有效避免外部环境与检测试剂交叉污染的试剂盒成为了业界需要解决的问题。

发明内容

针对现有技术的缺点，本发明的目的是提供一种用于检测HIV-1的试剂盒，其检测过程简便，检测时间短；扩增试剂高效灵敏、便于保存；检测过程封闭、可有效避免外部环境与检测试剂交叉污染。

为了实现上述目的，本发明提供了一种用于检测HIV-1的试剂盒，试剂盒包括扩增试剂；扩增试剂原料包括：

HIV-1引物探针序列；

保护剂，保护剂包括海藻糖、蔗糖和棉子糖；

灵敏度增强剂，灵敏度增强剂包括苏氨酸、牛血清白蛋白和TrisX-100；

扩增酶系，扩增酶系包括重组酶、辅助酶、单键结合蛋白、聚合酶和内切酶；

dNTPS。

本发明中，扩增试剂原料各组分混合在一起，呈液态；经过冻干工艺处理后得到干粉状的扩增试剂。

本发明中，HIV-1引物探针序列包括：

上游引物HIV-1F

5’-TGG CAG TAT TCA TTC ACA ATT TTA AAA GAA AAG G-3’；

下游引物HIV-1R

5’-CCCGAA AAT TTT GAA TTT TTG TAA TTT GTT TTT G-3’；

探针HIV-1P