[发明专利]一种养胃舒颗粒指纹图谱的构建方法

权利要求书

1.一种养胃舒颗粒指纹图谱的构建方法，其特征在于包括如下步骤：

步骤1：供试品溶液的制备

称取5.0-10.0g养胃舒颗粒加入25-100mL甲醇水溶液中，10-60℃下超声处理10-60min，冷却后过滤，所得滤液即为供试品溶液；

步骤2：对照品溶液的制备

以甲醇为溶剂，称取橙皮苷、哈巴俄苷、绿原酸分别配制成对照品溶液；

步骤3：色谱检测

分别吸取供试品溶液及对照品溶液各5-20μL，注入高效液相色谱仪检测，分别得到供试品溶液和对照品溶液的色谱图；

步骤4：利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，对供试品溶液和对照品溶液的色谱图分别进行数据导入、多点校正和数据匹配，采用中位数法，时间宽度为0.3min，即得指纹图谱；

步骤3中，色谱检测时使用250mm×4.6mm，5µm的Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱；

步骤3中，色谱检测参数如下：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A、以体积分数0.1%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱；检测波长为275-285nm；柱温25-40℃；流速为0.5-1.5mL/min；

梯度洗脱程序设置如下：

0min，流动相A所占体积为10%，余量为流动相B；

0-10min，流动相A所占体积为10%，余量为流动相B；

10min，流动相A所占体积为10%，余量为流动相B；

10-35min，流动相A所占体积由10%逐步递增至28%，余量为流动相B；

35min，流动相A所占体积为28%，余量为流动相B；

35-45min，流动相A所占体积由28%逐步递增至40%，余量为流动相B；

45min，流动相A所占体积为40%，余量为流动相B；

45-46min，流动相A所占体积由40%逐步递增至80%，余量为流动相B；

46min，流动相A所占体积为80%，余量为流动相B；

46-55min，流动相A所占体积为80%，余量为流动相B；

55min，流动相A所占体积为80%，余量为流动相B；

55-60min，流动相A所占体积由80%逐步递减至10%，余量为流动相B；

60min，流动相A所占体积为10%，余量为流动相B；

60-65min，流动相A所占体积为10%，余量为流动相B；

65min，流动相A所占体积为10%，余量为流动相B。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：

步骤1中，称取5.0-8.0g养胃舒颗粒加入25-50mL体积浓度40-80%的甲醇水溶液中，10-60℃下超声处理30-50min，冷却后过滤，所得滤液即为供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：

步骤2中，对照品溶液中，橙皮苷溶液的浓度为0.06mg/mL，哈巴俄苷的浓度为0.05mg/mL，绿原酸的浓度为0.05mg/mL。

4.一种如权利要求1所述的方法构建的养胃舒颗粒指纹图谱的应用，其特征在于：利用构建的指纹图谱检测养胃舒颗粒制剂的质量；包括如下步骤：

步骤1：待测品溶液的制备

精密称取5.0-10.0g待测养胃舒颗粒，加入25-100mL体积浓度0~100%甲醇溶液，10-60℃下超声处理10-60min，冷却后过滤，所得滤液即为待测品溶液；

步骤2：对照品溶液的制备

以甲醇为溶剂，分别配制成橙皮苷溶液的浓度为0.06mg/mL，哈巴俄苷的浓度为0.05mg/mL，绿原酸的浓度为0.05mg/mL的对照品溶液；

步骤3：色谱检测

分别吸取待测品溶液及对照品溶液各5-20μL，注入高效液相色谱仪检测，分别得到待测品溶液和对照品溶液的色谱图；

步骤4：利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，将所得待测品指纹图谱与构建的标准指纹图谱相比对，计算指纹图谱相似度，若相似度≥0.9且出现标准指纹图谱中的13个特征峰，与参照峰相应的峰为S峰，按照保留时间偏差不大于±5%的原则，将保留时间规定为：

1号峰：0.307±0.015；2号峰：0.346±0.017；3号峰：0.374±0.019；4号峰：0.397±0.020；5号峰：0.522±0.026；6号峰：0.610±0.030；7号峰：0.931±0.047；8号峰：1.000；9号峰：1.031±0.052；10号峰：1.246±0.062；11号峰：1.259 ±0.063；12号峰：1.309±0.065；13号峰：1.380±0.069；

各共有峰的相对保留时间在上述范围内，则该待测养胃舒颗粒质量合格。